LIBS技術(shù),,是當(dāng)前*份能夠測量所有種類的樣品、無須預(yù)處理,、并且單次測量即可得到全部元素特別包括輕元素在內(nèi)的“指紋”的光譜分析技術(shù)(Miziolek and others 2006),。LIBS可以實(shí)現(xiàn)微空間分辨率、低元素檢測極限的實(shí)時(shí)快速測量,,因此對于含特定特征元素的,、形體非常微小的微生物識別和分類具有獨(dú)到的優(yōu)勢。此外,,菌落的顏色,、質(zhì)地、細(xì)胞的成分都會作用于激光脈沖激發(fā)時(shí)呈現(xiàn)的等離子體發(fā)射光譜,,作為分類鑒定的依據(jù)(Lightigo團(tuán)隊(duì),,2018)。Sivakumar等人曾通過Mg,、P,、K、Na,、Ca等關(guān)鍵元素的特征譜線峰值差異,,判斷大腸桿菌是否已經(jīng)死亡;Multari等人曾通過LIBS技術(shù)在雞肉,、牛肉餡,、蛋殼、萵苣,、臘腸等食物上檢測到致病性大腸桿菌,;等等,。
LIBS的微生物識別和分類技術(shù),在土壤理化性質(zhì),、土壤營養(yǎng),、植物表型、作物營養(yǎng),、食品質(zhì)量檢測,、毒理學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究中的應(yīng)用迅速發(fā)展。
本研究中,,Lightigo團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)用LIBS技術(shù),,通過樣品的原子發(fā)射譜線分析,對大腸桿菌,、CCM4223金黃色葡萄球菌,、CCM 4750金黃色葡萄球菌(MRSA -甲氧西林耐藥)、CCM3953金黃色葡萄球菌- (MSSA-甲氧西林敏感),、葡萄球菌,、假中間葡萄球菌,共6種細(xì)菌實(shí)現(xiàn)了快速自動(dòng)檢測和分類,。
全部細(xì)菌樣本的LIBS譜線數(shù)據(jù)中,,Mg、Na,、Ca都為其主元素譜線,,呈現(xiàn)相近的譜線特征;其原因在于細(xì)菌細(xì)胞外膜中都含有Mg2+和Ca2+離子,,從而具有相近的元素構(gòu)成,,例如下圖的“CCM 4750金黃色葡萄球菌(MRSA -甲氧西林耐藥)”樣品的LIBS譜線:
但是,各個(gè)樣本的完整譜線“指紋”仍可以作為細(xì)菌樣品的分類依據(jù),。儀器軟件內(nèi)置的PCA算法是實(shí)現(xiàn)樣品分類可視化的常用的分析工具,,下圖為LIBS譜線PC1 vs. PC2處理結(jié)果:
可見,LIBS能夠?qū)?xì)菌樣品做出比較成功的分類,。在此基礎(chǔ)上,,Lightigo團(tuán)隊(duì)結(jié)合Raman光譜數(shù)據(jù),,進(jìn)一步提升了6類細(xì)菌樣品分類的精確度(100%):
Lightigo的LIBS元素分析技術(shù)在細(xì)菌鑒定,、檢測和分類的應(yīng)用中,,是一種快速、便捷并且具有前景的分析方法,。
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