近日,,北京易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司在陜西延安大學(xué)安裝了迄今為止國內(nèi)功能為齊全的FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng),,包括葉綠素?zé)晒獯銣绶治觥⒖焖俟忭憫?yīng)曲線測量,、光合有效輻射吸收系數(shù)測量,、快速熒光誘導(dǎo)曲線OJIP-test以及QA再氧化動(dòng)力學(xué)曲線測量,并能夠?qū)Ω鱾€(gè)測量參數(shù)及計(jì)算參數(shù)成像,。在安裝培訓(xùn)過程,,隨機(jī)使用了在校園里生長的染病蒲公英進(jìn)行了測試,結(jié)果表明該系統(tǒng)運(yùn)行良好,,對(duì)于病害的早期檢測能夠達(dá)到預(yù)期的效果,。
該套FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)既能做常見的葉綠素?zé)晒獯銣绶治觥?duì)各個(gè)參數(shù)(如Fv/Fm,、ΦPSII,、NPQ、Qp,、Rfd等)進(jìn)行成像和快速光響應(yīng)曲線測量(ETR-PAR或ETR-PPFD),,也能夠?qū)夂嫌行л椛湮障禂?shù)(通常采用0.8)測量成像,并且能夠做快速熒光誘導(dǎo)曲線OJIP的測量并各個(gè)參數(shù)(如φpo,、φEo ,、ψ0、ABS/RC,、TRo/RC,、ETo/RC、DIo/RC)的成像,,也可以做QA再氧化動(dòng)力學(xué)曲線的測量,。
因此,該成像系統(tǒng)既具備普通葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)的功能,如快速,、簡單,、高通量地測量光合作用;用于植物抗逆性研究,,判斷植株是否受到脅迫,、找到早期脅迫的部位、評(píng)估脅迫等級(jí),;用于大規(guī)模的高產(chǎn),、高抗性品種篩選等。并且有了OJIP-test及QA再氧化動(dòng)力學(xué)曲線這兩項(xiàng)功能的加持,,這套系統(tǒng)能夠更準(zhǔn)確地反映光合系統(tǒng)對(duì)光能的吸收、轉(zhuǎn)化以及耗散的情況以及PSII受體側(cè)對(duì)脅迫的響應(yīng),,可用來開展關(guān)于光合結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)致研究,。
測試前發(fā)現(xiàn)校園草地上生長的蒲公英葉片上有紅褐色的斑點(diǎn),這屬于病害的癥狀,。遂挖取了一株進(jìn)行測試,,希望利用葉綠素?zé)晒獬上癜l(fā)現(xiàn)肉眼尚不可見病斑、將來較大概率會(huì)出現(xiàn)可見病斑的綠色葉片(綠色感染葉片),,對(duì)病害發(fā)生的部位進(jìn)行預(yù)測,。
對(duì)上圖所示的一株離體的蒲公英依次進(jìn)行葉綠素?zé)晒獯銣绶治黾翱焖贌晒庹T導(dǎo)曲線OJIP-test測量,每次測試前暗適應(yīng)5min,。
葉綠素?zé)晒獯銣绶治龅闹饕獏?shù)的成像圖如下,,包括:
Fv/Fm:大光化學(xué)量子效率,表征PSII的光化學(xué)活性和能量轉(zhuǎn)化效率,;
φPSII:光下實(shí)際光化學(xué)量子效率,,表征PSII實(shí)際光合效率;
Rfd熒光衰減率:光適應(yīng)熒光衰減率,,表征植物葉片的光合作用潛力,;
NPQ:非光化學(xué)淬滅系數(shù),表征植物熱耗散水平,。
快速熒光誘導(dǎo)曲線OJIP-test主要參數(shù)的成像圖如下,,具體參數(shù)包括:
ABS/RC:反映單位反應(yīng)中心吸收的光能;
TRo/RC:反映單位反應(yīng)中心捕獲的用于還原QA的能量;
ETo/RC:反映單位反應(yīng)中心捕獲的用于電子傳遞的能量;
DIo/RC:反映單位反應(yīng)中心耗散掉的能量。
由葉綠素?zé)晒獯銣绶治黾翱焖贌晒庹T導(dǎo)曲線OJIP-test的各個(gè)參數(shù)的成像圖可見:
順時(shí)針對(duì)葉片進(jìn)行編號(hào)后(參見下圖),,綠色葉片①,、②、④以及帶有病斑的葉片③,、⑤,、⑥中,①和②(尤其葉尖部分)的熒光參數(shù)和病斑部位相近:如通過葉綠素?zé)晒獯銣绶治霁@得的大光化學(xué)量子效率、熒光衰減率及熱耗散水平,,以及通過OJIP-test獲得的單位反應(yīng)中心吸收的光能,、單位反應(yīng)中心捕獲的用于電子傳遞的能量。且相對(duì)于帶病斑葉片的綠色部位,,上述參數(shù)均較低,,表現(xiàn)了光系統(tǒng)較弱的能量吸收、有效轉(zhuǎn)化及耗散能力,,表明光系統(tǒng)受到一定程度的損傷,。
而④葉片整體和帶病斑葉片的綠色部位相近。此外,,同樣為綠色葉片,,葉片①和②整個(gè)葉片熒光參數(shù)的異質(zhì)性要高于葉片④,導(dǎo)致異質(zhì)性的來源極大可能來自病原體的侵染,。據(jù)此推測,,葉片④為綠色健康葉片,葉片①和②為綠色感染葉片,。
因此通過FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窨焖?、無損、高通量地測量植物的光合作用,,能夠?qū)χ参镉袩o受到脅迫,、脅迫的具體部位、脅迫的程度進(jìn)行快速的檢測和評(píng)估,,并對(duì)脅迫與光合結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系進(jìn)行細(xì)致的分析,、解釋。
FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)除具備目前上功能為齊全完備的葉綠素?zé)晒獬上癯绦蚝湍K外,,還具備紫外激發(fā)的多光譜成像模塊及GFP/YFP穩(wěn)態(tài)熒光成像,。前者能夠靈敏、特異性地評(píng)估植物生理狀態(tài)包括受脅迫狀態(tài),,包括干旱,、病蟲害、環(huán)境污染,、氮脅迫等,,后者則能夠檢測熒光蛋白在葉片水平的表達(dá),直觀地表現(xiàn)出轉(zhuǎn)錄基因的表達(dá)位置,。
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