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2021年11月5日，徠卡顯微成像用戶會在美麗的鵬城——深圳與大家如約而至,，這也是我們第一次為一個城市的用戶舉辦成像技術(shù)交流會,，當(dāng)天，80余位專家、青年學(xué)者,、研究人員參加了本次會議,。由此可見近些年來深圳這座年輕的城市在科研單位建設(shè)上的突飛猛進，也能看出當(dāng)?shù)氐目蒲泄ぷ髡邆儞肀录夹g(shù)的熱情,。
會上諸多Leica的資深用戶分享了自己的研究成果與心得體會,，我們一起來回顧下吧。
講題一：FLIM技術(shù)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用
講者：南方科技大學(xué) 魏聞捷 高級工程師

本次徠卡顯微成像技術(shù)交流會交流環(huán)節(jié)的開場報告由南方科技大學(xué)分析測試中心的魏聞捷老師帶來,，報告題目為“FLIM技術(shù)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用”,。本次報告中，魏老師不僅向我們清晰地講解了什么是熒光壽命,，如何在時域和頻域上測量熒光壽命,，如何利用不可見的熒光壽命進行成像（FLIM），還分析了使用徠卡顯微鏡進行實驗得到的FLIM數(shù)據(jù),，充分證明了FLIM在可以得到除了光譜信息之外的時間維度上的更多信息,。隨后魏老師引用了徠卡顯微鏡的實驗數(shù)據(jù)，介紹了FLIM在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用,，內(nèi)容包括FLIM-FRET在代謝組學(xué)研究中的優(yōu)勢：可拍攝到光鏡下很難拍攝到的過程（如病毒侵染過程）,；可進行瞬間/長時間的動態(tài)捕捉，定量精確,，可重復(fù)性好,，操作簡便；FLIM可利用自發(fā)熒光物質(zhì)作為生物傳感器進行微環(huán)境的探測,；FLIM可進行時間維度的熒光拆分等,。除此以外魏老師介紹了常用的FLIM分析軟件和APP，并對徠卡的FLIM模塊給予了高度評價,。魏老師坦言,，徠卡的FLIM模塊已經(jīng)整合進入徠卡共聚焦軟件，作為入門級的操作者,，只要會使用徠卡共聚焦顯微鏡,，就可以在進行高質(zhì)量成像的過程中輕易獲取到FLIM數(shù)據(jù)，對用戶非常友好,。徠卡顯微鏡的成像質(zhì)量配合功能強大的FLIM功能，將會為生物科研工作者提供強有力的支持,。

講題二：白激光在材料科學(xué)中的應(yīng)用
講者：香港科技大學(xué) 何威

何老師在報告中提到,，熒光在生活中無處不在，不同發(fā)光材料需要的激發(fā)光不同,，常規(guī)可選激光譜線：405,、488、514,、561,、633nm適用于生命科學(xué),，但不太能滿足發(fā)光材料科學(xué)的研究，往往無法達到最佳的激發(fā)效率,，可能錯失細胞成像中一些有趣的現(xiàn)象,。而徠卡白激光可實現(xiàn)1nm的步距連續(xù)調(diào)節(jié)激發(fā)光波長，助力于解決新開發(fā)的熒光材料成像問題,。
何老師實驗室研究的新型熒光染料AIEgens（聚集誘導(dǎo)發(fā)光分子）可覆蓋整個可見光波段,，乃至紫外和紅外，這就需要特別適合的激發(fā)光來進行生物成像,，徠卡最新推出的STELLARIS 8白激光從440到790nm連續(xù)可調(diào),，可讓發(fā)光材料的骨架設(shè)計更加靈活，并且白激光為脈沖激光,，可實現(xiàn)熒光壽命維度成像,。另外最新研究的激發(fā)光依賴性的簇發(fā)光材料，通過波長步長可調(diào)的激發(fā)光光源照射會發(fā)射出不同波長的光,，對于新材料在生物成像中的探索和應(yīng)用起到了推動作用,。
講題三：FLIM在生命科學(xué)及材料科學(xué)中的應(yīng)用
講者：中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院 張鵬飛 副研究員

本次報告中，張鵬飛首先講解了新型熒光材料的優(yōu)勢（抗漂白能力強,、Stokes位移大等）,，隨后向我們介紹了他所帶領(lǐng)的研究團隊一路走來所開發(fā)的熒光材料（包括近紅外量子點、AIE染料等）及其應(yīng)用,，還和我們分享了他們團隊熒光材料開發(fā)的成果及寶貴經(jīng)驗,。將FLIM技術(shù)和新型近紅外量子點“強強聯(lián)合”后，張老師的團隊實現(xiàn)了通過將熒光壽命及強度進行二維結(jié)合,，進一步實現(xiàn)了提高近紅外熒光材料的分辨能力,、長時間活細胞成像、活體微環(huán)境實時監(jiān)測等多項技術(shù)突破,；通過STED技術(shù)與AIE材料的“兄弟合力”,，張老師成功對活細胞骨架、活細胞的線粒體,、溶酶體以及活體的腫瘤組織進行了長時間的成像,。張老師在2012年發(fā)表的JACS中使用了徠卡SP5共聚焦顯微鏡，成功對病毒侵染細胞的過程進行了成像,，他認(rèn)為,，徠卡的FLIM和STED成像技術(shù)可以對熒光材料的開發(fā)及應(yīng)用方面發(fā)揮巨大作用，如今隨著徠卡STED和FLIM技術(shù)水平的不斷提升,，該類設(shè)備會有更多的應(yīng)用場景,。
講題四：活細胞線粒體STED超分辨成像研究
講者：深圳大學(xué) 楊志剛 副教授

最后一位為大家?guī)韺嶒灧窒淼氖巧钲诖髮W(xué)物理與光電工程學(xué)院的楊志剛老師，他介紹到線粒體內(nèi)膜結(jié)構(gòu)及動態(tài)變化研究可以預(yù)測免疫T細胞的免疫記憶能力，并且分裂線粒體的命運預(yù)測,，為線粒體相關(guān)疾病的早期診斷與干預(yù)提供有效手段,，而要研究這些，就涉及到超分辨成像,。楊老師課題組利用熒光探針進行活細胞超分辨成像及結(jié)構(gòu)測量研究,，而綜合成像分辨率和成像速度，STED超分辨成像具有顯著優(yōu)勢,。STED成像效果受到熒光探針性能好壞的影響,，想要獲得更高的分辨率，需要開發(fā)具有低損耗激光功率的新型熒光探針,，楊老師實驗室對此展開了以下三個方面的研究：
1.活細胞線粒體膜鄰位二巰基蛋白質(zhì)共價標(biāo)記
2.低功率損耗激光（紅色,、綠色活細胞長時程超分辨成像）
3.低功率單束激發(fā)光、單束損耗激光實現(xiàn)雙色或多色STED成像
最終開發(fā)了一種具有超低飽和損耗激光功率的新型方酸菁染料STED探針,，用于活細胞線粒體長時程動態(tài)變化超分辨成像及結(jié)構(gòu)測量,，為線粒體功能研究提供新的手段，并致力于設(shè)計優(yōu)化新型超分辨探針,，進行同步多色STED成像,，解決具體生物學(xué)問題。
除了各位用戶們精彩的科研分享,，來自徠卡的各位應(yīng)用專家們也向客戶們介紹了一些前沿技術(shù),，重新定義共聚焦的STELLARIS，融合了超分辨和熒光壽命的TauSTED,，多光子活體成像新技術(shù)DIVE和多功能AI圖像分析軟件AIVIA,。學(xué)術(shù)交流之后，各位參會者還積極的參加了現(xiàn)場的演示環(huán)節(jié),，從寬場到共聚焦,，從硬件到軟件，大家紛紛表示,，不斷推出的新產(chǎn)品,，對于科研的促進作用是顯而易見，只是一天時間太短,，不能充分的體會和感受,。好消息是我們的樣機會在深圳停留一段時間，如果有興趣進一步了解,，請聯(lián)系當(dāng)?shù)氐膹瓶üぷ魅藛T吧,，也期待我們來年再會。

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