癌癥研究：提取未稀釋的癌組織進(jìn)行DNA突變分析
DNA 突變導(dǎo)致異常蛋白質(zhì)或缺失功能蛋白質(zhì),，這可能導(dǎo)致細(xì)胞不受控制地增殖并變得癌變,。為了找到并理解特定癌癥類型的潛在突變，提取純腫瘤材料是極其重要的,。這尤其具有挑戰(zhàn)性,，特別是當(dāng)只有有限數(shù)量的癌性組織可用時(shí)（例如小轉(zhuǎn)移）。激光顯微切割允許提取純粹的癌性組織,，而不會(huì)用健康細(xì)胞污染您的樣本,。DNA 測序?qū)?dǎo)致有效且可重復(fù)的結(jié)果，幫助輕松識(shí)別致癌的 DNA 突變,，因?yàn)椴粫?huì)被污染的健康細(xì)胞掩蓋,。
精確到單細(xì)胞的 DNA 變異分析工作流程
徠卡的激光顯微切割系統(tǒng)將通過精確切割您感興趣的細(xì)胞來改善您的工作流程。每一步都在視覺控制下進(jìn)行,，并且不會(huì)與周圍組織污染,。
DNA 分析工作流程 - 步驟
通常，激光顯微切割使用特殊的基于膜的載玻片,。LMD的樣本準(zhǔn)備是簡單的,，可以從經(jīng)典的組織學(xué)準(zhǔn)備中得出,。
石蠟包埋將組織樣本帶入可以切成薄片的狀態(tài)?；蛘?，您可以利用冷凍切片來準(zhǔn)備您的載玻片,。如果有新鮮的癌組織可用,，您應(yīng)該優(yōu)先選擇冷凍切片以保護(hù)核酸不被降解。
我們將為您的應(yīng)用提供合適的LMD載玻片,。
一般來說,，可以使用石蠟切片或冷凍切片。這里我們將概述冷凍切片的使用,。
樣本切片應(yīng)在冷凍切片后立即用丙酮,、乙醇或乙醇和醋酸的混合物固定和染色。
H&E 是一種常見的組織學(xué)染色,，其中蘇木精染色細(xì)胞核,，伊紅染色細(xì)胞質(zhì)。
H&E 染色適用于石蠟切片和冷凍切片,。
徠卡 LMD激光顯微切割系統(tǒng)可以生成自動(dòng)樣本概覽,，便于輕松導(dǎo)航到您的感興趣區(qū)域 (ROI)。
您的 ROI 可以通過 AVC 軟件模塊自動(dòng)識(shí)別和標(biāo)記,，或者您可以手動(dòng)應(yīng)用形狀,。
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激光顯微切割文章與教程
接下來，定義的感興趣區(qū)域（ROIs）在視覺控制下被激光精確切割,，并通過重力直接收集,。視覺控制的切除可以防止腫瘤材料與健康細(xì)胞混合，從而扭曲結(jié)果,。通過重力收集允許使用標(biāo)準(zhǔn),、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的 耗材，如 PCR 管或 8 條管,。
此外,，您可以使用“移動(dòng)和切割"工具直接在飛行中切割樣本，而無需任何預(yù)定義形狀,。
我們提供適合您符合需求的LMD激光顯微切割系統(tǒng),。
徠卡顯微系統(tǒng)推薦使用高質(zhì)量的 QIAGEN 試劑盒（QIAamp® DNA Micro Kit）用于核酸的制備。
它們可以立即用于下游應(yīng)用,，如 PCR,、測序、定量實(shí)時(shí) PCR,，或者可以在-20°C 下存儲(chǔ),，直到需要時(shí)使用,。
DNA 突變分析是通過下一代測序（NGS）進(jìn)行的。
其他技術(shù)如焦磷酸測序或經(jīng)典的 DNA 桑格測序也適用,。
典型的研究領(lǐng)域
Pathology research 病理研究
Neuroscience 神經(jīng)科學(xué)
Pharmaceutical research 制藥研究
Plant research 植物研究
Epigenetics research 表觀遺傳學(xué)研究
典型的研究領(lǐng)域
LMD 傳單 – DNA 突變分析
LMD 應(yīng)用視頻
參考文獻(xiàn)：
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