猴痘,2019年底的病毒已經(jīng)肆虐2年多了,,還未結束,,新的一場潛在流行又開始若隱若現(xiàn),,這就是猴痘病毒。
猴痘是痘病毒科正痘病毒屬的一種,。猴痘是一種罕見的病毒性人畜共患?。◤膭游飩鞑ソo人的病毒),病人癥狀與過去在天花病人身上所觀察到的相似,,但臨床嚴重程度較輕,。隨著在1980年消滅了天花和隨后停止接種天花疫苗,猴痘成為最嚴重的正痘病毒,。1在非洲中部和西部地區(qū)熱帶雨林仍有猴痘散發(fā)病例,。在沉寂了多年之后,在2022年初猴痘病毒再次進入到大家的視野,。具路透財經(jīng)早報報道,,世界衛(wèi)生組織(WHO)周五召開緊急會議,討論最近爆發(fā)的猴痘疫情,,此前歐洲公布有100多例確診或疑似病例,。德國稱這是歐洲有史以來最大的猴痘疫情,至少有九個歐洲國家-比利時,、法國,、德國,、意大利,、荷蘭、葡萄牙,、西班牙,、瑞典和英國-以及美國、加拿大和澳大利亞報告了病例,。世衛(wèi)組織稱,,科學家們正在對不同病例的病毒進行研究,看看它們是否有關聯(lián),,預計將很快提供最新消息,。2
而對病毒進行研究首先需要對病毒分離,分離的常見方法是將從病人處取樣后的病毒感染宿主,,其可以是動物,、雞胚或細胞株,而較之前二者的成本,、生長環(huán)境的復雜性和易用性,,細胞株現(xiàn)在是常用的宿主。
以病毒的分離為例,,將狀態(tài)良好的Vero E6和Huh-7細胞分別接種于96孔細胞培養(yǎng)板,,培養(yǎng)24 h后備用,。凍存的鼻/咽拭子標本放置于冰上升溫而融化。棄96孔細胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)液,,每孔加入標本液25 μL,;每個標本分別接種2類細胞系。另外,,每個細胞系設2個對照孔,,每孔僅加入25 μL維持液。將接種好的細胞培養(yǎng)板于5% CO2,、37 ℃培養(yǎng)箱中孵育2 h,。然后棄接種的標本液,每孔加入100 μL DMEM維持液, 放置5% CO2,、37 ℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),,每日觀察細胞病變。如有細胞病變,,則在80%以上細胞單層被破壞時,,收取細胞培養(yǎng)物。對沒有出現(xiàn)的病變細胞,,收取上清液,,按類似方法盲傳2代,并對細胞培養(yǎng)物進行實時熒光定量聚合酶鏈反應(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,,熒光定量RT-PCR)檢測還可以利用反轉錄酶合成cDNA后進行測序,。3
在對細胞進行培養(yǎng)和感染過程中需要對活細胞的狀態(tài)快速檢驗,確保在合適的時機進行傳代和收獲病變的細胞,。而在此用途的睿智之選就是徠卡顯微系統(tǒng)的 DMi1倒置顯微鏡,。首先其可以靈活地切換S40聚光鏡(40-50mm工作距離)和S80聚光鏡(80mm工作距離)。其次,,高品質的徠卡物鏡,,提供色彩鮮明的圖像。再次,,深思熟慮的設計以及質量控制元件,,使用者即使面對冗長的工作,仍然可以舒適地工作,。在其做相襯觀察時,,使 用 簡 便, 只 需 輕松旋轉物鏡轉換盤,,即可在10x至20x至40x相襯之間切換,。無需改變相襯插板中的相襯環(huán)——PH1相襯環(huán)匹配全部三種物鏡!且智能功能使的工作流程順暢,、高效,,節(jié)省了時間和資源,。最后,徠卡顯微系統(tǒng)的高品質成像技術提供精準的結果,,降低出錯的風險,。顯微鏡的LED照明意味著低能源成本以及最小的停工時間。無需經(jīng)常更換燈泡,,或等待達到合適的色溫,。除了上述介紹的光學和機械設計,DMi1還有相機版本,,其是圖像采集和細胞培養(yǎng)存檔的一體式解決方案,。您可以在250萬或500萬像素分辨率之間選擇。機安裝在支架背面,。無需額外的三目鏡筒,,可獲清晰視圖及輕松進入工作區(qū)域。使用遙控采集圖像甚至視頻,。數(shù)據(jù)直接存儲在SD卡上,,無需使用電腦。相機可連接任意HDMI顯示器,,與同事或學生一起進行討論,。HDMI端口可在屏幕上提供優(yōu)質的圖像。若需要測量和批注,,提煉圖像分析,,系統(tǒng)中包含用于PC的徠卡應用套件(LAS)軟件的核心版本可以完成此項工作。DMi1還是在中國生產(chǎn)的具有百年德國光學傳承的產(chǎn)品,,兼顧品質和成本優(yōu)勢,,為了方便臨床使用還專門有醫(yī)療器械注冊證:滬械注準20202220450,。
2019-2022在接連的各種高傳染力的病毒輪番上陣之時,,徠卡顯微系統(tǒng)有專門的解決方案為病毒的研究保駕護航。
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