猴痘,,2019年底的病毒已經(jīng)肆虐2年多了,還未結(jié)束,新的一場(chǎng)潛在流行又開(kāi)始若隱若現(xiàn),,這就是猴痘病毒,。
猴痘是痘病毒科正痘病毒屬的一種。猴痘是一種罕見(jiàn)的病毒性人畜共患?。◤膭?dòng)物傳播給人的病毒),病人癥狀與過(guò)去在天花病人身上所觀察到的相似,,但臨床嚴(yán)重程度較輕,。隨著在1980年消滅了天花和隨后停止接種天花疫苗,猴痘成為最嚴(yán)重的正痘病毒,。1在非洲中部和西部地區(qū)熱帶雨林仍有猴痘散發(fā)病例。在沉寂了多年之后,,在2022年初猴痘病毒再次進(jìn)入到大家的視野,。具路透財(cái)經(jīng)早報(bào)報(bào)道,世界衛(wèi)生組織(WHO)周五召開(kāi)緊急會(huì)議,,討論最近爆發(fā)的猴痘疫情,,此前歐洲公布有100多例確診或疑似病例。德國(guó)稱這是歐洲有史以來(lái)最大的猴痘疫情,,至少有九個(gè)歐洲國(guó)家-比利時(shí),、法國(guó)、德國(guó),、意大利,、荷蘭、葡萄牙,、西班牙,、瑞典和英國(guó)-以及美國(guó)、加拿大和澳大利亞報(bào)告了病例,。世衛(wèi)組織稱,,科學(xué)家們正在對(duì)不同病例的病毒進(jìn)行研究,看看它們是否有關(guān)聯(lián),,預(yù)計(jì)將很快提供最新消息,。2
而對(duì)病毒進(jìn)行研究首先需要對(duì)病毒分離,分離的常見(jiàn)方法是將從病人處取樣后的病毒感染宿主,,其可以是動(dòng)物,、雞胚或細(xì)胞株,而較之前二者的成本,、生長(zhǎng)環(huán)境的復(fù)雜性和易用性,,細(xì)胞株現(xiàn)在是常用的宿主。
以病毒的分離為例,將狀態(tài)良好的Vero E6和Huh-7細(xì)胞分別接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,,培養(yǎng)24 h后備用,。凍存的鼻/咽拭子標(biāo)本放置于冰上升溫而融化。棄96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)液,,每孔加入標(biāo)本液25 μL,;每個(gè)標(biāo)本分別接種2類細(xì)胞系。另外,,每個(gè)細(xì)胞系設(shè)2個(gè)對(duì)照孔,,每孔僅加入25 μL維持液。將接種好的細(xì)胞培養(yǎng)板于5% CO2,、37 ℃培養(yǎng)箱中孵育2 h,。然后棄接種的標(biāo)本液,每孔加入100 μL DMEM維持液, 放置5% CO2,、37 ℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),,每日觀察細(xì)胞病變。如有細(xì)胞病變,,則在80%以上細(xì)胞單層被破壞時(shí),,收取細(xì)胞培養(yǎng)物。對(duì)沒(méi)有出現(xiàn)的病變細(xì)胞,,收取上清液,,按類似方法盲傳2代,并對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,,熒光定量RT-PCR)檢測(cè)還可以利用反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA后進(jìn)行測(cè)序,。3
在對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和感染過(guò)程中需要對(duì)活細(xì)胞的狀態(tài)快速檢驗(yàn),確保在合適的時(shí)機(jī)進(jìn)行傳代和收獲病變的細(xì)胞,。而在此用途的睿智之選就是徠卡顯微系統(tǒng)的 DMi1倒置顯微鏡,。首先其可以靈活地切換S40聚光鏡(40-50mm工作距離)和S80聚光鏡(80mm工作距離)。其次,,高品質(zhì)的徠卡物鏡,,提供色彩鮮明的圖像。再次,,深思熟慮的設(shè)計(jì)以及質(zhì)量控制元件,,使用者即使面對(duì)冗長(zhǎng)的工作,仍然可以舒適地工作,。在其做相襯觀察時(shí),,使 用 簡(jiǎn) 便, 只 需 輕松旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換盤(pán),,即可在10x至20x至40x相襯之間切換,。無(wú)需改變相襯插板中的相襯環(huán)——PH1相襯環(huán)匹配全部三種物鏡,!且智能功能使的工作流程順暢、高效,,節(jié)省了時(shí)間和資源,。最后,徠卡顯微系統(tǒng)的高品質(zhì)成像技術(shù)提供精準(zhǔn)的結(jié)果,,降低出錯(cuò)的風(fēng)險(xiǎn),。顯微鏡的LED照明意味著低能源成本以及最小的停工時(shí)間。無(wú)需經(jīng)常更換燈泡,,或等待達(dá)到合適的色溫,。除了上述介紹的光學(xué)和機(jī)械設(shè)計(jì),DMi1還有相機(jī)版本,,其是圖像采集和細(xì)胞培養(yǎng)存檔的一體式解決方案,。您可以在250萬(wàn)或500萬(wàn)像素分辨率之間選擇,。機(jī)安裝在支架背面,。無(wú)需額外的三目鏡筒,可獲清晰視圖及輕松進(jìn)入工作區(qū)域,。使用遙控采集圖像甚至視頻,。數(shù)據(jù)直接存儲(chǔ)在SD卡上,無(wú)需使用電腦,。相機(jī)可連接任意HDMI顯示器,,與同事或?qū)W生一起進(jìn)行討論。HDMI端口可在屏幕上提供優(yōu)質(zhì)的圖像,。若需要測(cè)量和批注,,提煉圖像分析,系統(tǒng)中包含用于PC的徠卡應(yīng)用套件(LAS)軟件的核心版本可以完成此項(xiàng)工作,。DMi1還是在中國(guó)生產(chǎn)的具有百年德國(guó)光學(xué)傳承的產(chǎn)品,,兼顧品質(zhì)和成本優(yōu)勢(shì),為了方便臨床使用還專門(mén)有醫(yī)療器械注冊(cè)證:滬械注準(zhǔn)20202220450,。
2019-2022在接連的各種高傳染力的病毒輪番上陣之時(shí),,徠卡顯微系統(tǒng)有專門(mén)的解決方案為病毒的研究保駕護(hù)航。
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DMi1倒置顯微鏡
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