激光共聚焦顯微鏡在生物學(xué)上的應(yīng)用
1.適用于細(xì)胞生物學(xué),、細(xì)胞生理學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)和神經(jīng)生理學(xué)等幾乎所有涉及細(xì)胞研究領(lǐng)域,。
2.對活細(xì)胞進(jìn)行無損傷性的實時觀察分析,,進(jìn)行形態(tài)和功能相結(jié)合的研究。對細(xì)胞檢測無損傷,、,、可靠和優(yōu)良重復(fù)性;數(shù)據(jù)圖象可及時輸出或長期儲存。
3.對活細(xì)胞和組織或細(xì)胞組織切片進(jìn)行連續(xù)斷層掃描,,能獲得精細(xì)的單個細(xì)胞或一群細(xì)胞或所觀察的局部組織的各個層面結(jié)構(gòu)(二維和三維)(包括細(xì)胞特異結(jié)構(gòu)-如細(xì)胞骨架,、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng),,樣品的深層結(jié)構(gòu))和完整的三維圖像(如分析隨時間變化,,即四維圖象,也可進(jìn)行隨熒光波長變化的圖象,,即可達(dá)到更多維的圖象),。定位組織細(xì)胞及其他所需要觀察的對象結(jié)構(gòu)的空間位置,進(jìn)行實時動態(tài)的觀察,、分析和記錄,;分析的定性、定量,、定時和定位分布,。
4.熒光標(biāo)記探針標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的細(xì)胞生物物質(zhì),膜標(biāo)記,、細(xì)胞示蹤,、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng),、受體或配體,,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進(jìn)行同時多重物質(zhì)標(biāo)記,,同時觀察,。
5.細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記,單標(biāo)記或多重標(biāo)記,,檢測細(xì)胞內(nèi)如pH和鈉,、鉀、鈣,、鎂等離子濃度的比率測定及其動態(tài)變化,;
6.細(xì)胞膜電位測量,自由基的檢測等,;
7.進(jìn)行定位的熒光漂白恢復(fù)實驗,,結(jié)合熒光漂白中熒光丟失實驗,研究細(xì)胞間通訊和其他有關(guān)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)(分子等)的運動,;在時間掃描實驗和光漂白(光淬滅)實驗中,,可同時對每個通道的數(shù)據(jù)和圖象進(jìn)行同時輸出和轉(zhuǎn)換。進(jìn)行熒光共振能量轉(zhuǎn)移實驗,,通過熒光波長的變化,,研究細(xì)胞內(nèi)分子,、離子的運動,相互作用,。
8.有非常(空間定位,、定量、定波長,、定時間),、靈敏,、快速和能在同一時間內(nèi)完成對細(xì)胞組織多重?zé)晒鈽?biāo)記(即使是發(fā)射波長非常接近,,比如相差只有數(shù)nm的多重?zé)晒?的各種波長圖象的分離和觀察分析,以及多重?zé)晒鈽?biāo)記共定位等的在線測量分析功能
激光共聚焦顯微鏡在生物領(lǐng)域的*性
與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比,, 激光共聚焦顯微鏡 具有更高的分辨率,,實現(xiàn)多重?zé)晒獾耐瑫r可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點,在對生物樣品的觀察中,, 激光共聚焦顯微鏡 有如下*性:
1,、對活細(xì)胞組織或細(xì)胞切片進(jìn)行連續(xù)掃描,可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架,、染色體,、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)的三維圖像。
2,、可以得到比普通熒光顯微鏡更高對比度,、高解析度圖像,同時具有高靈敏度,,杰出樣品的保護(hù),。
3、多維圖像的獲得,。如7維圖像(XYZaλIt):xyt ,、xzt 和xt掃描,時間序列掃描,、旋轉(zhuǎn)掃描,、區(qū)域掃描、光譜掃描,,同時方便進(jìn)行圖像處理,。
4、細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記,。單標(biāo)記或多標(biāo)記,,檢測細(xì)胞內(nèi)如PH和鈉、鈣,、鎂等離子濃度的比率測定及動態(tài)變化,。
5,、熒光標(biāo)記。探頭標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的活細(xì)胞生物物質(zhì),,膜標(biāo)記,、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng),、受體或配體,、核酸等觀察;可以在同一張樣品上同時進(jìn)行多重物質(zhì)標(biāo)記,,同時觀察,。
6、對細(xì)胞檢測無損傷,、,、可靠和優(yōu)良重復(fù)性;數(shù)據(jù)圖像可及時輸出或長期儲存,。
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