高單個神經(jīng)元切割
實現(xiàn)基因表達的可靠分析
帕金森癥是一種常見的進行性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,，它與黑質(zhì)中釋放多巴胺的神經(jīng)元細胞死亡有關(guān)。受疾病感染的多巴胺釋放神經(jīng)元與健康神經(jīng)元在基因表達譜上存在差異,，而這種差異有助于確定治療的靶基因,。
對于基因表達分析來說，研究整體組織是徒勞無意義的,，單細胞分辨率才是關(guān)鍵,。如果分析多巴胺釋放神經(jīng)元與所有其他腦細胞的混合物，會影響研究結(jié)果,。
采用徠卡的激光顯微切割 (LMD) 方法能夠特異地從帕金森癥患者尸檢組織中分離單個多巴胺能神經(jīng)元,，從而進行分析，消除因檢測不均質(zhì)細胞群體造成的誤判,。
研究領(lǐng)域
• 阿爾茨海默癥
• 發(fā)育生物學
• 衰老
• 腫瘤組織的突變分析
• 其他疾病
參考文獻
• Casli et al., Neuroscience, 2016
• Schlaudraff et al., Neurobiology of Aging, 2014, 35 (10)
• Bandyopadhyay et al., JoVE, 2014, 83
• Gründemann et al., NAR, 2008, 36 (7)
• Ramirez et al., Nature Genetics, 2006, 38
單細胞精度的基因表達分析工作流程
樣本制備
使用冷凍切片機切片,，隨后將制備好的切片放在特制的 LMD 載玻片上。
固定和染色
將組織固定并染色,，用于后續(xù)顯微成像和激光顯微切割,。可使用染色儀實現(xiàn)自動化,。
可視化和定義 ROI
自動生成樣本概覽,。可以自動或手動輕松識別和標注感興趣區(qū)域 (ROI),。
激光顯微切割
可使用Leica LMD系統(tǒng),，自動切割ROI區(qū)域，并借助重力將切割下來的組織收集到 PCR管或 8 聯(lián)管等標準且經(jīng)濟的實驗室耗材之中,。
基因表達分析
使用傳統(tǒng)的 qPCR ,，或者使用微陣列或下一代測序 (NGS) 等技術(shù)進行基因表達分析。
您將享受如下優(yōu)勢：
無接觸式單細胞切割
徠卡提供的激光顯微切割系統(tǒng)是實現(xiàn)單細胞高精度切割的理想之選,。您可以一邊觀察,，一邊輕松切割單個細胞。無接觸切割有助于防止核糖核酸酶等產(chǎn)生的污染,。
使用徠卡顯微系統(tǒng)提供 的LMD 系統(tǒng),，通過重力收集分離純化后的物質(zhì)
激光顯微切割前、后的小鼠大腦冷凍切片,。甲苯胺藍染色,。
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