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液相色譜儀的發(fā)展歷史

點擊次數(shù):3541 發(fā)布時間:2012-8-12

  1960年代,,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,,為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì),,氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜,。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯,、荷瓦斯(Horvath),、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上*臺液相色譜儀,,開啟了液相色譜的時代,。液相色譜使用粒徑更細的固定相填充色譜柱,提高色譜柱的塔板數(shù),,以高壓驅(qū)動流動相,,使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成。
   1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實踐》一書,,標志著液相色譜法 (HPLC)正式建立,。在此后的時間里,液相色譜成為zui為常用的分離和檢測手段,,在有機化學(xué),、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué),、藥物開發(fā)與檢測,、化工、食品科學(xué),、環(huán)境監(jiān)測,、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料,、檢測技術(shù),、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展。
   1960年代前,,使用的填充粒大于100μm,,提高柱效面臨著困境,后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸,??瓶颂m,、荷瓦斯制備成功薄殼型固定相,這種在固定相在玻璃微球表面具有多孔薄殼,,實現(xiàn)了高速傳質(zhì),,為液相色譜技術(shù)的發(fā)展奠定了穩(wěn)固的基礎(chǔ)。隨著填料粒徑的降低,,更高的柱效也得以實現(xiàn),。1960年代研制出氣動放大泵、注射泵及低流量往復(fù)式柱塞泵,,但后者的脈沖信號很大,,難以滿足液相色譜的要求。1970年代,,往復(fù)式雙柱塞恒流泵,,解決了這一問題。1970年代后科克蘭制備出全多孔球形硅膠,,平均粒徑只有7μm,,具有*的柱效,并逐漸取代了無定形微粒硅膠,。之后又制造出的鍵合固定相使柱的穩(wěn)定性大為提高,,多次使用成為可能。1970年后,,適合分離生物大分子的填料又成為研究的熱點,。1980年后,改善分離的選擇性成為色譜工作者的主要問題,,人們越來越認識到改變流動相的組成是提高選擇性的關(guān)鍵,。

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