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顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡,。 20是在1590年由荷蘭的楊森父子所*?,F(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡可把物體放大1500倍,,分辨的zui小極限達(dá)0.2微米,。光學(xué)顯微鏡的種類很多,,除一般的外,,主要有暗視野顯微鏡一種具有暗視野聚光鏡,,從而使照明的光束不從*部分射入,而從四周射向標(biāo)本的顯微鏡.熒光顯微鏡以紫外線為光源,,使被照射的物體發(fā)出熒光的顯微鏡,。 電子顯微鏡是在1931年在德國柏林由克諾爾和哈羅斯卡首先裝配完成的,。這種顯微鏡用高速電子束代替光束。由于電子流的波長比光波短得多,,所以電子顯微鏡的放大倍數(shù)可達(dá)80萬倍,,分辨的zui小極限達(dá)0.2納米。1963年開始使用的掃描電子顯微鏡更可使人看到物體表面的微小結(jié)構(gòu),。 光學(xué)顯微鏡的分類,,根據(jù)照明方法,有透射型與反射(落射)型二種,。透射型顯微鏡是應(yīng)用透射照明通過透明物體的打光方法,。反射型顯微鏡是以物鏡上方打光到(落射照明)不透明的物體上。另一種分類方法,,系根據(jù)觀察方法的差異,,分為明視野顯微鏡、暗視野顯微鏡,、相位差顯微鏡,、偏光顯微鏡、干涉相位差顯微鏡,、熒光顯微鏡等,。每種顯微鏡一般又各有透射型和反射型二種。在這些顯微鏡中,,特別是明視野顯微鏡是構(gòu)成所有顯微鏡中組成zui基本的基礎(chǔ),。通過這種顯微鏡觀察的物體,穿過透過(吸收)率,、反射率,,因場所不同而各不相同,這種物體被稱為隨照明光強(qiáng)度(振幅)變化振幅物體,,無色透明物體只有在照明相位改變時(shí),,才能被肉眼觀察到,由於明視野顯微鏡不能改變相位,,所以對透明不染色標(biāo)本不能被觀察到。 光學(xué)顯微鏡是為了使肉眼看不清楚的標(biāo)本影像,,人們設(shè)想經(jīng)過一種裝置,,使肉眼能夠觀察到該標(biāo)本組織形態(tài)和其間的結(jié)構(gòu)。這種設(shè)想的裝置就被后人創(chuàng)造問世了,。當(dāng)前廣泛應(yīng)用在各種微小物體的觀察,、測定、分析,、分類,、鑒定等,。在波長范圍上也不限於可見光波段(4000~7000 )而且(>2000 )到紅外(1~2u)以及用眼睛觀察、顯微,、攝影和一般輻射檢測器放大,。 顯微鏡的綜合倍率是物鏡倍率g1與目鏡倍率g2的乘積,g=g1×g2,。g1是1~100倍,,g2是5~20的范圍。數(shù)值孔徑(numerical aperture)n.a.是決定物鏡的分辨率,、焦深,、圖像亮度的基本數(shù)據(jù),當(dāng)物鏡焦點(diǎn)對好后,,物鏡前透鏡zui邊緣處的傾斜光線與顯微鏡光軸所交角成α,,此即該物鏡的半孔徑角設(shè)標(biāo)本數(shù)據(jù)空間的折射率為n,則n.a.=n×sinα,。n通常在空氣中為1,,在物鏡與標(biāo)本間浸入水、甘油,、油脂時(shí),,該標(biāo)本折射率,即隨浸液不同而異,。這種物鏡稱為浸液系物鏡,;如是空氣時(shí),稱為干燥系物鏡,。 在顯微鏡上,,限制視野的裝置是視野光圈。以物鏡側(cè)觀看這種視野光圈時(shí)的直徑以mm單位表示的值稱為視野數(shù),。實(shí)際視野=視野,。實(shí)際視野=視野數(shù)/物鏡倍率 例如,視野數(shù)為20,,則10×物鏡就觀看2mm視野范圍,。應(yīng)用聚光鏡時(shí),根據(jù)可變的視野光圈,,再決定選用聚光鏡的n.a.值,,其值是取決於可變聚光鏡孔徑光圈來確定