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微孔板恒溫振蕩器在牛奶抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用
點(diǎn)擊次數(shù):4191 發(fā)布時(shí)間:2011-9-22
溶液的配制
1,、稀釋抗體溶液:將抗體濃縮液搖勻,用緩沖液10倍稀釋抗體濃縮液,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
2、稀釋酶結(jié)合物:將酶結(jié)合物濃縮液搖勻,,用緩沖液10倍稀釋酶結(jié)合物濃縮液,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
3,、底物溶液的配制:用底物緩沖液10倍稀釋底物濃縮液,,根據(jù)需要的量現(xiàn)用現(xiàn)配,底物溶液變藍(lán)禁止使用,。
七,、樣品的前處理方法:
牛奶:新鮮牛奶或解凍牛奶50µL,加水950µL,,1:20稀釋,,作樣品液備用。
八,、檢測步驟:
1,、剪開錫箔袋,,按每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液和樣品提取液2孔計(jì)算所需微孔板條的數(shù)量,插入框架,。
2,、各取系列標(biāo)準(zhǔn)液和樣品液20µL分別加到其對應(yīng)微孔中,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣品加雙孔,。
3,、每孔加稀釋好的酶結(jié)合物20µL。
4,、每孔加稀釋好的抗體100µL,,在MicBio-IV微孔板恒溫振蕩器上*混勻,用封口膜封好,,室溫孵育30分鐘,。
5、倒出孔內(nèi)液體,,在吸水紙上拍打,,使孔中沒有殘留的液體。使用多道移液器,,每孔加水250µL,,再傾倒干凈。如此洗板,,重復(fù)三次,。
6、每孔加底物溶液100µL,,室溫避光孵育30分鐘,。
7 、每孔加終止液100µL,,混勻,。
8 、在450nm波長處測吸光度值,。60分鐘內(nèi)讀數(shù),。