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基因?qū)雰x是生物領(lǐng)域研究中的一種常用的儀器,。廣泛應(yīng)用于各種動(dòng)物,、植物細(xì)胞和微生物的電穿孔,也可作細(xì)胞雜交,、融合、基因?qū)氲难芯俊?br /> 基因?qū)雰x的基本原理
國內(nèi)外眾多學(xué)者對(duì)適當(dāng)?shù)拿}沖電磁場(chǎng)作用下,,細(xì)胞膜發(fā)生電穿孔的現(xiàn)象展開研究,。細(xì)胞電穿孔技術(shù)利用高壓電脈沖使細(xì)胞膜發(fā)生瞬間的可逆穿孔,對(duì)受體細(xì)胞產(chǎn)生的擾動(dòng)很小,,強(qiáng)度適當(dāng)?shù)碾娒}沖會(huì)使細(xì)胞的外壁產(chǎn)生許多“小孔”,,此時(shí),溶液中的基因就會(huì)通過這些小孔進(jìn)入細(xì)胞,,經(jīng)過一段時(shí)間后,,細(xì)胞壁將會(huì)自動(dòng)修復(fù),這樣就實(shí)現(xiàn)了電脈沖的基因?qū)恕?br /> 由于細(xì)胞電穿孔技術(shù)的性,、低毒性,、普適性和可控性,電穿孔技術(shù)已廣泛用于遺傳工程,、細(xì)胞工程和基因工程等領(lǐng)域,。目前國內(nèi)外又將電穿孔技術(shù)應(yīng)用于基因治療、藥物增敏,、臨床等諸多方面,,必將給予人類深遠(yuǎn)的影響。
外加電場(chǎng)之所以能夠擊穿細(xì)胞膜,,主要是因?yàn)榧?xì)胞膜基本上是一個(gè)絕緣體,,兩面浸在含離子的電解質(zhì)溶液中,,當(dāng)外加電場(chǎng)時(shí),引起膜兩邊的電解質(zhì)離子極化,,而形成了外加的膜電位,。
若細(xì)胞為球形,懸浮在溶液里并處于電場(chǎng)中,,因此可以得到外電場(chǎng)誘導(dǎo)的膜電位表示為Vm=:1.E0cosθ
式中.a(chǎn)為細(xì)胞半徑,,E0為外電場(chǎng)強(qiáng)度,θ為給定膜位置與電場(chǎng)方向間夾角,。
此公式是細(xì)胞電穿孔的理論基礎(chǔ),。不同脈沖波形對(duì)細(xì)胞電穿孔有重要影響。目前用得zui多的直流脈沖是方波和指數(shù)衰減的RE波形,。指數(shù)衰減波形的脈沖zui易制造,,效果較好,所以用途也zui廣,。
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