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超分辨率顯微鏡平臺LiveCodim是一個通用的超分辨率成像平臺,，具有任何標準熒光顯微鏡使用的接口。它是高分辨率,、低光毒性的活體成像解決方案,。
超分辨率顯微鏡平臺應用
超分辨率顯微鏡平臺建立了一種新的超分辨率成像模式，為SR在細胞生物學中的主要關鍵挑戰(zhàn)提供了答案：保持生物樣品的完整性,、技術復雜性,。
超分辨率顯微鏡平臺包含一個通用的附加組件，用于任何標準顯微鏡,。它包括寬視場,、共焦和超分辨率模式，以提供一個完整的解決方案,，特別適合改裝,。
這項技術基于獲得patent的錐形衍射顯微鏡（CODIM）強大的光束整形器，能產(chǎn)生可控的和局部的光模式,，用于掃描光毒性非常低,、光漂白可以忽略的生物樣品。

超分辨率顯微鏡平臺工作步驟
第一步：
在共焦顯微鏡上設置定期實時觀察,，并優(yōu)化圖像采集設置,。
第二步：
將所需區(qū)域放置在整個視野的中心，并執(zhí)行5倍共焦放大,。
第三步：
選擇要在超分辨率模式下成像的感興趣區(qū)域,，并定義CODIM采集設置。
第四步：
啟動CODIM超分辨率采集,，然后在共焦窗口中確認結果,。
第五步：
反復重復這個過程，檢查多個區(qū)域,。
超分辨率顯微鏡平臺優(yōu)勢
•高性能超分辨率多色成像| 4個熒光通道
•分辨率更好或等于120 NM XY |使用光結構和掃描點方法提高分辨率
•活體細胞成像?低光毒性和低光漂白使體內SR研究成為可能
•穿透深度?Z疊加能力和“抑制"來自其他平面的信號
•標準樣品制備?標準熒光顯微鏡樣品制備流程
•與所有熒光顯微鏡無縫集成
•精簡易用的應用?自主處理算法,，無需用戶調整多個參數(shù)

超分辨率顯微鏡平臺技術
錐形衍射光束整形器
2006年，gabriely.Sirat證明了錐形衍射可以作為一種實用的光束整形工具,，并建議創(chuàng)建一種多功能的光束整形器,，并將其應用于超分辨熒光顯微鏡。薄雙軸晶體將規(guī)則入射光束的點擴散函數(shù)（PSF）轉化為一系列廣泛的光分布,，分布的選擇由輸入和輸出偏振控制,。
實際上，光束整形是通過在可控偏振器之間封閉雙軸晶體來實現(xiàn)的,；這種簡單的光學裝置,，類似于偏振計,，能夠在微秒甚至更快的時間內從一種模式切換到另一種具有不同拓撲結構的模式。此外,，這些圖案是*共局域化的,，因為它們是由相同的主光束產(chǎn)生的。
利用CODIM實現(xiàn)超分辨率
CODIM光束整形器被用作共焦模塊的附加組件,，并在樣品上掃描分布,，為每個掃描點產(chǎn)生幾個顯微圖像。由于點掃描的幾何結構,，我們的系統(tǒng)創(chuàng)建了一個減少的漫射光數(shù)量相比,，基于廣域技術。
CODIM光束整形器使用錐形衍射原理產(chǎn)生緊湊的局部光分布,。每個顯微圖像包含大量的高頻,，接近阿貝極限（與艾里模式相比，高達3倍）（圖4）,。
投影在樣品上的這些光分布是使用復雜的專有算法進行分析的,。這允許重建超分辨率圖像，對于一般物體,，分辨率提高到2倍,。此外，這些算法,，利用正約束和稀疏性,，允許分辨率進一步提高，為足夠的樣本,。
最終,，低得多的峰值功率分布、高量子產(chǎn)率相機的使用以及更長的相機曝光時間的結合,，大大降低了發(fā)送到樣品的光的峰值功率和能量,。這就是這種方法光漂白和光毒性很低的原因。這也避免了熒光團飽和的問題,，使該方法線性和定量,。