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激光共聚焦掃描顯微鏡主要有四部分組成
閱讀:2813 發(fā)布時間:2022-12-9 激光共聚焦掃描顯微鏡主要有四部分組成:1,、顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)。2,、掃描裝置,。3、激光光源,。4,、檢測系統(tǒng)。整套儀器由計算機控制,,各部件之間的操作切換都可在計算機操作平臺界面中方便靈活地進(jìn)行,。
1、顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)
顯微鏡是顯微鏡的主要組件,它關(guān)系到系統(tǒng)的成象質(zhì)量,。顯微鏡光路以無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)可方便地在其中插人光學(xué)選件而不影響成象質(zhì)量和測量精度,。物鏡應(yīng)選取大數(shù)值孔徑平場復(fù)消色差物鏡,有利于熒光的采集和成象的清晰,。物鏡組的轉(zhuǎn)換,,濾色片組的選取,載物臺的移動調(diào)節(jié),,焦平面的記憶鎖定都應(yīng)由計算機自動控制,。
2、掃描裝置
激光共聚焦掃描顯微鏡使用的掃描裝置在生物領(lǐng)域一般為鏡掃描,。由于轉(zhuǎn)鏡只需偏轉(zhuǎn)很小角度就能涉及很大的掃描范圍,,圖象采集速度大大提高,512×512畫面每秒可達(dá)4幀以上,,有利于那些壽命短的離子作熒光測定,。掃描系統(tǒng)的工作程序由計算機自動控制。
3,、激光光源
顯微鏡使用的激光光源有單激光和多激光系統(tǒng),。多激光器系統(tǒng)在可見光范圍使用多譜線氬離子激光器,發(fā)射波長為457nm,、488nm和514nm的藍(lán)綠光,,氦氖綠激光器提供發(fā)射波長為543nm的綠光,氦氖紅激光器發(fā)射波長為633nm的紅光,,新的405nm半導(dǎo)體激光器的出現(xiàn)可以提供近紫外譜線,,但是小巧便宜而且維護(hù)簡單。
4,、檢測系統(tǒng)
激光共聚焦掃描顯微鏡為多通道熒光采集系統(tǒng),,一般有三個熒光通道和一個透射光通道,能升級到四個熒光通道,,可對物體進(jìn)行多譜線激光激發(fā),,樣品發(fā)射熒光的探測器為感光靈敏度高的光電倍增管PMT,配有高速12位A/D轉(zhuǎn)換器,,可以做光子計數(shù),。PMT前設(shè)置針孔,由計算機軟件調(diào)節(jié)針孔大小,,光路中設(shè)有能自動切換的濾色片組,,滿足不同測量的需要,也有通過光柵或棱鏡分光后進(jìn)行光譜掃描功能的設(shè)置。