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關于血清的一些問題
點擊次數(shù)：1758 發(fā)布時間：2015-8-14
關于血清的一些問題
血清是細胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一,。因此，我們特別整理了一些實驗室里常會遇到的問題,，供大家參考：
1． 存放血清的方法,？
我們建議血清應保存在－20℃以下,。然而，若存放于4℃時,，請勿超過半個月,。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。
2． 如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損？
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,，先置于2～8℃冰箱使之融解,，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,，溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。
3． 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理,？
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,，但zui普遍地原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖素蛋白（形成凝血地蛋白之一）在血清解凍后,，也會存在于血清中,，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,，并不影響血清本身的質(zhì)量,。
若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),，稍微離心,，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議你以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,，因為它可能會阻塞您的過濾膜,。
4．為什么要熱滅活血清？
加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細胞事件,，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細胞和巨噬細胞,。在免疫學研究，培養(yǎng)ES細胞,，昆蟲細胞和平滑肌細胞時,，推薦使用熱滅活血清。
5．有必要做熱滅活嗎？
實驗顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,，對大多數(shù)的細胞而言是不需要的 。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,，或*沒有任何作用,，甚至通常因為高溫處理影響了血清的活性，而造成細胞生長速度的降低,。而經(jīng)過熱處理的 血清,，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,，像是“小黑點",，常常會讓研究者誤以為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步,。如此以來,，不但節(jié)省你寶貴的時間，更確保血清的質(zhì)量,。
6．如何避免沉淀物的生產(chǎn),？
我們建議您在使用血清的時候，注意下列的操作：
⑴.解凍血清時,，請按照所建議的逐步解凍法（－20℃至4℃至室溫）,，若血清解凍時改變的溫度太大（如－20℃至37℃），實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
⑵.解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生
⑶.請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,，而影響血清的質(zhì)量,。
⑷.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無須做此步驟,。
⑸.若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃,，30分鐘的原則,，并且隨時搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,，都會造成沉淀物的增多