QQ交談
MSN交談
您所在位置：請輸入產(chǎn)品關鍵字：
郵編：201100
聯(lián)系人：陳
電話：021-64133189
傳真：021-64129208
手機：13788995069
留言：發(fā)送留言
個性化：www.runwelltac.com
網(wǎng)址：www.runwelltac.com
商鋪：http://sorrent.com.cn/st111352/
細菌數(shù)量的測定方法
點擊次數(shù)：2057 發(fā)布時間：2010-7-21
細菌數(shù)量的測定方法
1、計數(shù)器測定法
即用血細胞計數(shù)器進行計數(shù),。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi),，用顯微鏡觀察計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的（0.1mm3）,，因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細菌數(shù),，可計算樣品中的含菌數(shù)。本法簡便易行,，可立即得出結(jié)果,。本法不僅適于細菌計數(shù)，也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù),。
2,、電子計數(shù)器計數(shù)法
電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個細胞,，當一個細胞通過這個小孔時,，電阻明顯增加，形成一個脈沖,，自動記錄在電子記錄裝置上,。該法測定結(jié)果較準確，但它只識別顆粒大小,，而不能區(qū)分是否為細菌,。因此，要求菌懸液中不含任何碎片,。
3,、活細胞計數(shù)法
常用的有平板菌落計數(shù)法，是根據(jù)每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的,。取一定容量的菌懸液,，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng),，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),，可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。此法靈敏度高,，是一種檢測污染活菌數(shù)的方法,，也是目前上許多國家所采用的方法。
使用該法應注意：
①一般選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù),，過多或過少均不準確,；
②為了防止菌落蔓延,，影響計數(shù),，可在培養(yǎng)基中加入0.001%一氯化三苯基四氮唑（TTC）；
?、郾痉ㄏ抻糜谛纬删涞奈⑸?。
廣泛應用于水,、牛奶、食物,、藥品等各種材料的細菌檢驗,，是zui常用的活菌計數(shù)法。
4,、比濁法
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細菌的數(shù)量,。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比，與光密度成正比,，所以,，可用光電比色計測定菌液，用光密度（OD值）表示樣品菌液濃度,。此法簡便快捷,，但只能檢測含有大量細菌的懸浮液，得出相對的細菌數(shù)目,，對顏色太深的樣品,，不能用此法測定。
5,、測定細胞重量法
此法分為濕重法和干重法,。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進行稱重；干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,，以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,，使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,，是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法,。
6、測定細胞總氮量或總碳量
氮,、碳是細胞的主要成分,，含量較穩(wěn)定，測定氮,、碳的含量可以推知細胞的質(zhì)量,。此法適于細胞濃度較高的樣品。
7,、顏色改變單位法（colour change unit,簡稱CCU）
這種方法通常用于很小，用一般的比濁法無法計數(shù)的微生物,，比如支原體等，因為支原體的液體培養(yǎng)物是*透明的,，呈現(xiàn)為清亮透明紅色,，因此無法用比濁法來計數(shù),，由于支原體固體培養(yǎng)很困難，用cfu法也不容易計數(shù),，因此需要用特殊的計數(shù)方法,，即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標,，來計數(shù)微生物的相對含量的,，下面以解脲脲原體為例，簡單介紹其操作：
（1）取12只無菌試管,，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養(yǎng)基,。
（2）在*管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,，充分混勻,，從中吸取0.2ml加入第二管，依次類推,，10倍梯度稀釋,，一直到zui末一管。
?。?）于37度培養(yǎng),，以培養(yǎng)基顏色改變的zui末一管作為待測菌液的CCU，也就是支原體的zui大代謝活力,，比如第六管出現(xiàn)顏色改變,，他的相對濃度就是10的6次方CCU/ml。
一般來說,，比濁法和菌落計數(shù)法就可以滿足絕大多數(shù)細菌的計數(shù),，但是對支原體這樣比較特殊的微生物，用CCU法比較合適,。測定微生物生長的方法很多,，各種方法均有其優(yōu)缺點，也不是在任何情況下都適用,。在微生物學工作中一般常用的是平皿菌落計數(shù)法,、計數(shù)器法和比濁法。至于哪種方法比較適合,，還得根據(jù)具體條件而定,。