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技術(shù)文章
Caspase活性檢測(cè)相關(guān)問(wèn)題解答
點(diǎn)擊次數(shù)：3621 發(fā)布時(shí)間：2012-2-1
Caspase活性檢測(cè)相關(guān)問(wèn)題解答
1：Caspase活性測(cè)試是如何使用的？www.runwelltac.com
答：Caspase活性測(cè)試為在細(xì)胞裂解液中檢測(cè)蛋白酶活性提供了簡(jiǎn)捷方便的手段,。當(dāng)對(duì)專一Caspase的多肽底物被裂解時(shí),，釋放出的指示分子可用普通讀光儀或熒光讀板儀來(lái)做定量測(cè)定。將從細(xì)胞凋亡樣本得到的信號(hào)同未經(jīng)誘導(dǎo)的對(duì)照樣本進(jìn)行比較,，可以確定Caspase活性增加的倍數(shù),，而Caspase酶活性是同檢測(cè)到的信號(hào)直接成正比。
2：Caspase活性測(cè)試是否可用于定量檢測(cè),？
答：R&D Systems的Caspase活性測(cè)定試劑盒可作為半定量測(cè)試,。檢測(cè)結(jié)果用于測(cè)量在細(xì)胞凋亡細(xì)胞中與未經(jīng)誘導(dǎo)細(xì)胞中的Caspase活性倍數(shù)的增加。實(shí)驗(yàn)時(shí),，采用本底對(duì)照(無(wú)細(xì)胞裂解液或無(wú)底物的反應(yīng)),。如果本底對(duì)照也有一定的讀數(shù)，這一讀數(shù)應(yīng)當(dāng)在記算倍數(shù)增加之前從試驗(yàn)數(shù)據(jù)中差減,。
www.biomart.cn/runwell/index.htm
3：Caspase活性檢測(cè)同Caspase ELISA試劑盒有何不同,？
答：Caspase活性檢測(cè)用于測(cè)定不同Caspase的蛋白酶的活性，表達(dá)為比未誘導(dǎo)樣本的倍數(shù)增加,。Caspase ELISA試劑盒用于測(cè)定不同Caspase在樣本中的含量,，以pg /mL定量表達(dá)。
4：caspase X 活性測(cè)試是對(duì)caspase X專一的嗎,？
答：大多數(shù)caspase會(huì)裂解所有的底物,，它們根據(jù)Michaelis-Menton動(dòng)力學(xué)趨于選擇某一底物而非另一底物，但沒(méi)有任何底物是對(duì)某一Caspase專一的,。比如,，Caspase 3和Caspase 7都可裂解DEVD底物；Caspase 9,、4,、5 都可裂解LEHD。R&D Systems為每一Caspase選擇了它所適宜的底物,。如果反應(yīng)進(jìn)行的太久,，一些Caspase會(huì)激活另一些Caspase。
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5：Caspase活性檢測(cè)試劑盒中的細(xì)胞裂解液是否同其它試劑盒中的一樣,？
答：所有的Caspase活性檢測(cè)試劑盒中的細(xì)胞裂解液都是一樣的,。所以，可用它裂解細(xì)胞,，和用于多種Caspase活性的測(cè)試,。
6：R&D Systems的Caspase抑制劑是否可逆？
答：所有R&D Systems的Caspase抑制劑在N端有苯甲氧碳基(Z-)和FMK功能組,，它們可穿孔細(xì)胞,，是不可逆轉(zhuǎn)的,。
7：R&D Systems是否為Caspase活性檢測(cè)提供陽(yáng)性對(duì)照？
答：R&D Systems提供多種重組Caspase酶,，它們是理想的陽(yáng)性對(duì)照,。如果試驗(yàn)者自己想建立一陽(yáng)性對(duì)照，有許多可以產(chǎn)生細(xì)胞凋亡的陽(yáng)性對(duì)照的方法都已發(fā)表,。如果將細(xì)胞同2 mM星形孢菌素(Staurosporin)溫育2小時(shí),，可誘導(dǎo)絕大多數(shù)細(xì)胞類型進(jìn)入細(xì)胞凋亡。R&D Systems有文獻(xiàn)資料列舉了對(duì)Caspase如何產(chǎn)生陽(yáng)性對(duì)照,，可向我們的技術(shù)服務(wù)索取,。