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技術(shù)文章
常見小鼠采血方法
點(diǎn)擊次數(shù):3920 發(fā)布時(shí)間:2011-8-1
小鼠給藥與采血常見方法
一,、小鼠灌胃
小鼠灌胃方法比較簡單,,需要關(guān)注的只有兩點(diǎn):
1)要保持小鼠的頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進(jìn)入;
2)動(dòng)作要輕柔,從口角進(jìn)入,防止損失食道,。做的多了自然就熟練了,。
具體操作過程如下:
1. 準(zhǔn)備灌胃針頭。一般可以從市場(chǎng)上面買到,,實(shí)在沒有的話,,可以用12號(hào)的針頭,剪去針尖,,用砂紙將頭端磨平,,也可以用。但是買的灌胃針頭的頭端用錫或者適宜的方法處理了針頭的銳口,,自己用砂紙不可能將所有的銳口都磨掉,,用這樣的針頭灌胃,損失小鼠食道的可能性比較大,。
2.抓住小鼠,,使其頭、頸和身體呈一直線,。抓小鼠的動(dòng)作很簡單,,左手的小指和無名指抓住小鼠的尾巴,另外三個(gè)手指抓住小鼠的頸部即可,。因?yàn)樾∈笫冀K在活動(dòng)中,,若一次抓的感覺不是很順手,要放開重新抓,,不要逞強(qiáng)進(jìn)行下一步操作,。
3. 抓好小鼠就可以灌胃了,一般用1ml的注射器配灌胃針頭,。灌胃針頭從小鼠的嘴角進(jìn)入,,壓住舌頭,抵住上顎,,輕輕向內(nèi)推進(jìn),,進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感,進(jìn)入食道后就可以推注藥液了,。(我認(rèn)為,,所謂的灌胃,不必要灌胃針頭進(jìn)入小鼠的胃部,進(jìn)入食管后就可以推藥了,,這樣對(duì)小鼠食道的損傷要小點(diǎn),,特別是要長期灌胃給藥的情況下。)當(dāng)然,,灌胃針頭也可以再往里面深入一點(diǎn),,防止藥液從口中流出。
4. 灌胃容積一般是0.1~0.2ml/10g,,zui大0.35ml/10g,,每只小鼠的灌胃zui大容積不超過0.8ml。
二,、小鼠腹腔注射
腹腔注射是常見的給藥方式,,尤其是在麻醉時(shí)。常見的麻醉方法均是麻醉yao物腹腔注射,。
1. 小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器,,配合4號(hào)針頭。
2. 腹腔注射時(shí)右手持注射器,,左手的小指和無名指抓住小鼠的尾巴,,另外三個(gè)手指抓住小鼠的頸部,使小鼠的頭部向下,。這樣腹腔中的器官就會(huì)自然倒向胸部,,防止注射器刺入時(shí)損傷大腸、小腸等器官,。進(jìn)針的動(dòng)作要輕柔,,防止刺傷腹部器官。
3. 尤其是對(duì)于體重較小的小鼠,,腹腔注射時(shí)針頭可以在腹部皮下穿行一小段距離,,是從腹部一側(cè)進(jìn)針,穿過腹中線后在腹部的另一側(cè)進(jìn)入腹腔,,注射完藥物后,,緩緩拔出針頭,并輕微旋轉(zhuǎn)針頭,,防止漏液,。
4. 小鼠腹腔注射的給藥容積一般為5~10ml/kg。
三,、小鼠靜脈注射
這也是常見的操作,,稍微有點(diǎn)難度,沒有指導(dǎo)的話,,一開始可能會(huì)感覺有點(diǎn)手足無措,。但是可以肯定的說,,只要掌握了方法,小鼠的尾靜脈注射還是很容易的,。
操作步驟:
1. 首先要固定小鼠,,zui簡單的固定方法就是把小鼠放在盒子里面,讓它的尾巴伸在盒蓋的外面,,用手抓住小鼠尾巴,,輕輕往外拽,就可以固定好小鼠了,。這種固定方法,,小鼠可以在盒子里面活動(dòng),固定的也不是很牢固,,但是只要你尾靜脈注射的手法很熟練,就足以用來注射了,。
還有的固定方法就是用一個(gè)小的圓筒,,是金屬做的,(可以在當(dāng)?shù)氐蔫F匠鋪,,或者買白鐵鋪里面定做)首先是金屬比較結(jié)實(shí),,而且可以用來固定在鐵架臺(tái)上,方便操作,。圓筒的一段有個(gè)蓋子可以拿下來,,蓋子中間有個(gè)小孔,可以讓小鼠的尾巴伸出來(中間的小孔可以用膠布纏一下,,防止銳利的邊緣割傷小鼠尾巴),。另外一段可以用金屬網(wǎng)的結(jié)構(gòu),網(wǎng)的形狀可以做成子彈頭的頭端形狀,。網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)可以讓光線透近來,,方便小鼠鉆進(jìn)圓筒里面。圓筒的長度約10cm,,直徑約 3~4cm,,可以做個(gè)系列長度和直徑的圓筒,適合不同大小的小鼠,。
2. 固定好小鼠后就是注射了,,一般用一次性的1ml的注射器就可以了,玻璃 的1ml的注射器也可以用,,針頭用4號(hào)的就可以了,。
3. 注射前首先要讓小鼠的血管充盈??梢圆捎?5%的酒精棉球擦拭的方法或者采用溫水浸泡的方法,。若小鼠的血管很不清楚,推薦采用溫水浸泡的方法,水溫以不燙手為宜,。溫水浸泡2~3分鐘后,,取出小鼠尾巴,用干棉球擦拭,。等一會(huì)兒,,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以進(jìn)針了,。若血管還不充盈,,可以反復(fù)用溫水浸泡,切不可冒險(xiǎn)注射,,除非你手法很熟練,,另當(dāng)別論。
4. 小鼠尾部共有四條血管,,一般認(rèn)為左右的兩條靜脈比較容易注射,,多采用這兩條靜脈進(jìn)針。一般要求進(jìn)針部位靠近小鼠的尾端,,這樣若注射失敗的話,,還可以再向上選擇進(jìn)針點(diǎn)。但是進(jìn)針部位也不可以太靠下,,因?yàn)樵酵?,靜脈越細(xì),操作越難,,一般以小鼠尾巴下三分之一的位置比較好,。
5. zui關(guān)鍵的就是進(jìn)針了。進(jìn)針時(shí)操作者左手食指和拇指固定住小鼠的尾巴,,讓小鼠的尾巴在經(jīng)過拇指后向下彎曲,,進(jìn)針點(diǎn)靠近拇指指甲。針頭和血管呈約30°角,,針尖斜面朝上,,輕輕挑刺入皮膚后針頭立即和血管平行,一般情況下一次就可以進(jìn)入血管,,可以將針頭刺入血管一大半,,左右輕輕晃動(dòng)針頭,確定針頭在血管內(nèi),,就可以推注藥液了,,正常情況下,推注的過程應(yīng)該沒有明顯阻力,,血管也不會(huì)鼓起,。推液時(shí)動(dòng)作宜輕柔,,若發(fā)現(xiàn)血管鼓起,那是針頭沒有刺入血管,,需立即拔出針頭,。
四、下注射給藥
將藥液推入皮下結(jié)締組織,,經(jīng)毛細(xì)血管,、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)的過程。作皮下注射常選項(xiàng)背或大腿內(nèi)側(cè)的皮膚,。操作時(shí),,常規(guī)消毒注射部位皮膚,然后將皮膚提起,,注射針頭取一鈍角角度刺入皮下,,把針頭輕輕向左右擺動(dòng),易擺動(dòng)則表示已刺入皮下,,再輕輕抽吸,,如無回血,可緩慢地將藥物注入皮下,。拔針時(shí)左手拇,、食指捏住進(jìn)針部位片刻,,以防止藥物外漏,。注射量約為0.1~0.3ml/10g體重。
五,、皮內(nèi)注射給藥
將藥液注入皮膚的表皮河之間,,觀察皮膚血管的通透性變化或皮內(nèi)反應(yīng),接種,、過敏實(shí)驗(yàn)等一般作皮內(nèi)注射,。先將注射部位的被毛剪掉,局部常規(guī)消毒,,左手拇指和食指按住皮膚使之繃緊,,在兩指之間,用結(jié)核菌素注射器連接4.5針頭穿刺,,針頭進(jìn)入皮膚淺層,,再向上挑起并梢刺入,將藥液注入皮內(nèi),。注射后皮膚出現(xiàn)一白色小皮丘,,而皮膚上的毛孔極為明顯。注射量為0.1ml/次,。
六,、肌肉注射給藥
小鼠體積小,,肌肉少,很少采用肌肉注射,。當(dāng)給小鼠注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時(shí),,采用肌肉注射。操作時(shí)1人固定小鼠,,另一人用左手抓住小鼠的1條后肢,,右手拿注射器。將注射器與半腱肌呈90°角迅速插入1/4,,注入藥液,,用藥量不超0.1ml/10g體重。
七,、靜脈注射給藥
將小鼠放在金屬籠或鼠夾中,,通過金屬籠或鼠夾的孔拉出尾巴,用左手抓住小鼠尾巴中部,。小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈,,2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩惻的靜脈.拔去沿尾部靜脈走向的毛,,置尾巴于45~50℃溫水中浸泡幾分鐘或用75%酒精棉球反復(fù)擦拭尾部,,以達(dá)到消毒和使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的。行尾部靜脈注射時(shí),,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩惻,,使靜脈更為充盈,用中指從下面托起尾巴,,以無名指夾住尾巴的末梢,右手持4號(hào)針頭注射器,,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針,,開始注入藥物時(shí)應(yīng)緩慢,,仔細(xì)觀察,如果無阻力,,無白色皮丘出現(xiàn),,說明已刺入血管,可正式注入藥物,。有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥,,注射部位應(yīng)盡可能從尾端開始,按次序向尾根部移動(dòng),,更換血管位置注射給藥,。注射量為0.05~0.1ml/10g體重。拔出針頭后,,用拇指按住注射部位輕壓1~2min,,防止出血,。
八、小鼠采血
1.剪尾采血
手拇指和食指從背部抓住小鼠頸部皮膚,,將小鼠頭朝下,,小鼠保定后將其尾巴置于50°熱水中浸泡數(shù)分鐘,使尾部血管充盈,。擦干尾部,,再用剪刀或刀片剪去尾尖1~2mm,用試管接流出的血液,,同時(shí)自尾根部向尾尖按摩,。取血后用棉球壓迫止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。每次采血量0.1ml,。
2.摘除眼球采血
左手抓住小鼠頸部皮膚,,輕壓在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,取側(cè)臥位,,左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,,使眼球突出。用眼科彎鑷迅速夾去眼球,,將鼠倒立,,用器皿接住流出的血液。采血完畢立即用紗布?jí)浩戎寡?。每次采血?.6~0.1ml,。
3.心臟采血
小鼠仰臥位固定,剪去胸前區(qū)被毛,,皮膚消毒后,,用左手食指在左側(cè)第3~4肋間觸摸到心搏處,,右手持帶有4~5號(hào)針頭的注射器,,選擇心搏zui強(qiáng)處穿刺,當(dāng)刺中心臟時(shí),,血液會(huì)自動(dòng)進(jìn)入注射器,。每次采血量0.5~0.6ml。
4.?dāng)囝^采血
動(dòng)物醫(yī)學(xué)論壇右手用剪刀剪斷小鼠頸部約1/2~4/5,,讓血液流入試管,。此法可采血0.8~1.2ml。