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技術(shù)文章
酶的提取和分離純化
點擊次數(shù):2037 發(fā)布時間:2011-3-28
酶的提取和分離純化
(一)細胞破碎處理www.runwelltac.com
許多酶都存在于細胞內(nèi)。為了提取這些胞內(nèi)酶,首先需要對細胞進行破碎處理,。細胞破碎的方法很多,主要包括機械破碎法,、物理破碎法,、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機,、研磨器或勻漿器等將細胞破碎,。物理破碎法是指利用溫度差,、壓力差或超聲波等將細胞破碎?;瘜W破碎法是指利用甲醛,、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變,。酶學破碎法是指選用合適的酶,,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎,。
(二)提取
酶 的提取是指在一定條件下,,用適當?shù)娜軇┨幚砑毎扑楹蟮暮冈希姑赋浞值厝芙獾教崛∫褐械倪^程,。酶的提取方法有過柱法,、鹽溶液提取法、堿溶液提取法和有機溶劑提取法等,。為了提高酶的提取率和防止酶提取后變性失活,,提取過程中必須注意保持適宜的溫度和pH值,并且添加適量的保護劑,。
(三)分離
提取液中含有多種酶,,要想從提取液中分離純化出某一種酶,必須根據(jù)這種酶的特性,,選擇合適的分離純化方法,。酶分離純化的方法很多,可利用酶相對分子質(zhì)量的大小進行分離純化,,如通過透析的方法分離酶等,。