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血清對細(xì)胞生長具有促進(jìn)作用
點(diǎn)擊次數(shù)：1720 發(fā)布時(shí)間：2018-3-6
血清是一種成分復(fù)雜的混合物，且對細(xì)胞生長具有促進(jìn)作用,，我們培養(yǎng)細(xì)胞離不開血清,。那在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響都有哪些表現(xiàn)？
1,、細(xì)胞生長速度緩慢,，長滿單層時(shí)間長；從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞,，用同一種培養(yǎng)液,，分別加入10％的對照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時(shí),，會出現(xiàn)對照血清長滿單層,，而待檢血清大約只有60～70％，這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞,。
2,、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常，細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化 ,；由于血清的質(zhì)量問題,，使原本狀態(tài)正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差；
比如：細(xì)胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動(dòng)的小黑點(diǎn)（并非污染）,，或者細(xì)胞表面形成一層油狀覆蓋物,；細(xì)胞的輪廓變得模糊，細(xì)胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,，從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展生長,。
3,、細(xì)胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,，不能連續(xù)傳代 ,；質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子，會使細(xì)胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力,。細(xì)胞會從正常的貼壁狀態(tài),，邊緣開始萎縮，上翹,。觀察到的現(xiàn)象就是細(xì)胞表面不光滑,，晃動(dòng)細(xì)胞瓶會看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動(dòng)。隨著傳代次數(shù)增加,，細(xì)胞萎縮的情況越來越嚴(yán)重,，直到終*脫壁而死亡。
4,、細(xì)胞長的很好,，致密的單層，狀態(tài)也很正常,，但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變,，做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因?yàn)?血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體,。
比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體,，牛腹瀉病毒抗體等，如果存在這些抗體,，就會把接進(jìn)去的病毒給中和掉,。如果抗體滴度很高，病毒會被抗體*中和,，就沒有病毒顆粒在細(xì)胞中增殖,，所以會檢測不到病毒滴度。
這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當(dāng)大的,，不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費(fèi),，浪費(fèi)人力、物力,，尤其是時(shí)間上的浪費(fèi),，從培養(yǎng)細(xì)胞開始到接病毒，到收液至少需要一兩個(gè)月,，一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況,，那么這一兩月時(shí)間就白白浪費(fèi)掉了，這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風(fēng)險(xiǎn)之一,。
5,、細(xì)胞生長的狀態(tài)一般,，產(chǎn)毒少，毒價(jià)低,。這種情況比較常見,，細(xì)胞是病毒的載體，由于血清質(zhì)量不好,，導(dǎo)致細(xì)胞生長狀態(tài)不好,，病毒就無法進(jìn)行正常的復(fù)制。并非所有病毒都不能復(fù)制,，所以就造成疫苗的效價(jià)不夠,，可能造成不合格產(chǎn)品。