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技術(shù)文章
標記的鏈霉卵白素-生物素法
點擊次數(shù)：2643 發(fā)布時間：2011-3-10
標記的鏈霉卵白素-生物素法
www.runwelltac.com標記的鏈霉卵白素-生物素法（LSAB）
標記的鏈霉卵白素-生物素法（LSAB法）是標記的卵白素技術(shù),，20世紀80年代開始采用,。
基本試劑：
① *抗體；
② 生物素化第二抗體,；
③ 辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素,。
① *抗體；
② 生物素化第二抗體,；
③ 辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素,。
實驗方法：
1. 將固定后的標本用PBS漂洗；
2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,，用來密封內(nèi)源性過氧化物酶,；
3. TBS漂洗3次，每次1min,；
4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min,；
5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內(nèi)過夜；
6. TBS漂洗3次,，每次1min,；
7. 滴加二抗后于室溫放置30min；
8. 將標本于生物素化的第二抗體在室溫孵育10min,；
9. TBS沖洗3次,，每次1min；
10. 再與稀釋的LSAB在室溫孵育10min,；
11. 重復(fù)步驟9,；
12. 用DAB或AEC顯色,；
13. 用蒸餾水反復(fù)沖洗；
14. 用蘇木精復(fù)染,；
15. 封片,；
1. 將固定后的標本用PBS漂洗；
2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,，用來密封內(nèi)源性過氧化物酶,；
3. TBS漂洗3次，每次1min,；
4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min,；
5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內(nèi)過夜；
6. TBS漂洗3次,，每次1min,；
7. 滴加二抗后于室溫放置30min；
8. 將標本于生物素化的第二抗體在室溫孵育10min,；
9. TBS沖洗3次,，每次1min；
10. 再與稀釋的LSAB在室溫孵育10min,；
11. 重復(fù)步驟9,；
12. 用DAB或AEC顯色,；
13. 用蒸餾水反復(fù)沖洗；
14. 用蘇木精復(fù)染,；
15. 封片,；