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技術(shù)文章
細胞培養(yǎng):細胞生長緩慢怎么辦?
點擊次數(shù):4397 發(fā)布時間:2017-6-16
在細胞培養(yǎng)的實驗中,難免會遇到這樣那樣的問題,,比如細胞不貼壁,、HP值變化迅速、細胞凋亡,、等等,。
細胞生長緩慢
1.培養(yǎng)基或血清改變:比較不同培養(yǎng)基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無差異,;通過生長實驗比較新老批次血清有無差異,;增大細胞初始接種密度;使細胞逐步適應新的培養(yǎng)基,。
2.必需生長促進成分(如L-谷氨酰胺或生長因子)耗竭,、缺乏或分解:去除原培養(yǎng)基,加入新鮮培養(yǎng)基,;向培養(yǎng)基中添加生長促進成分(如L-谷氨酰胺),。
3.輕度細菌或真菌污染:在不添加抗生素的條件下進行培養(yǎng),如細胞被污染,,滅菌處理后丟棄,。
4.時間存儲不當:血清應于-5℃至-20℃下儲存;培養(yǎng)基應于2℃~8℃下避光儲存,;盡量減少血清和培養(yǎng)基見光時間,。
5.細胞初始接種密度低:增大活細胞接種密度。
6.細胞衰老,、老化:將老化細胞丟棄,,取用代數(shù)較少的細胞。
7.支原體污染:隔離細胞,,檢測是否感染支原體,;清洗通風廚和培養(yǎng)箱,如細胞被污染,,滅菌處理后丟棄,。