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技術(shù)文章
組織細胞內(nèi)抗原的固定性
點擊次數(shù)：1620 發(fā)布時間：2017-4-13
組織細胞內(nèi)抗原的固定是免疫酶標和非標記免疫酶組織化學方法中的重要環(huán)節(jié),。經(jīng)過固定，可以達到如下目的：1.標本在玻片上的吸著力增加,；2.標本所含的類脂和蠟質(zhì)等成分可以除去，從而有利于抗原與酶標記抗體的結(jié)合,；3.標本的保存時間可以增長,，組織切片固定后，在－20℃,，可以存放一年以上而不改變免疫酶技術(shù)的染色,；組織內(nèi)有關(guān)抗原不同，則所用固定劑與固定方法也隨之改變,。
丙酮和乙醇是常用的兩種固定劑,。但對于許多病毒與細菌的定位研究，選擇丙酮和四氯化化碳作為固定劑是zui合適的,；對于可溶性蛋白抗原的定位,，常用乙醇；對于多糖,，則用8%－10%福爾馬林,，而不用乙醇與丙酮等有機溶劑。
對于植物病毒材料的固定,，丙酮用得zui多,，乙醇次之。因為丙酮對病毒的抗原性損害為zui小,，但對于那些不穩(wěn)定的病毒,，則應(yīng)避免固定。
在應(yīng)用免疫酶技術(shù)時,，固定處理對酶的活性的影響也得心中有數(shù),。許多固定劑對抗原的活性都 會有所損害，例如，福爾馬林對蛋白抗原的固定造成抗原性的破壞非常明顯,。因此,，對福爾馬林的使用必須嚴格控制濃度，一般使用的福爾馬林濃度為10%,，盡管如此,，對抗原的抗原性還是有損害，所以必須進行抗原修復(fù),。