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技術文章
免疫組化抗原修復注意事項
點擊次數：1998 發(fā)布時間：2016-11-24
免疫組化抗原修復注意事項
1,、pH的應用范圍及選擇
抗原修復液的pH非常重要，有效的抗原修復pH要比修復液的化學成分更重要,，同樣的修復液隨著pH的升高染色的強度逐漸增強,，但*pH范圍為6.0-10.0。目前大家*的的抗原修復液是pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液和pH8.0的EDTA緩沖液,。作為通用修復液堿性pH的修復液要比酸性的有效,，而對固定很長時間舊的存檔組織，酸性pH的修復液則優(yōu)于堿性的修復液,。
2,、抗原修復時應選擇*溫度
70-90℃的溫度對未經固定的蛋白質可發(fā)生變性，但經福爾馬林固定的蛋白質,，溫度必須達到92℃以上方能使其變性,。研究結果顯示，溫度為92-98℃是合適的,，95℃效果,。
3、抗原修復液必須遵循自然降溫規(guī)律,，否則效果不好或達不到抗原修復的目的
抗原修復持續(xù)時間過后,，取出放于室溫中讓其慢慢地降溫，不能為了爭取時間,，強行用冰塊或冷水使其降溫,。這是因為當高溫中的抗原蛋白分子鏈脫離了其他的束縛或聯結，要有一個自然環(huán)境讓其自然放松下來,，隨著溫度的降低,，它們會慢慢地恢復原來的形態(tài)和構型。
4,、盡量使用足量的抗原修復液
應用于抗原修復的液體,，一定要充足，防止切片干涸。應用大量的抗原修復液時,，由于它的量較大,，可延緩液體的沸騰時間，增加切片受微波輻射的量,，對抗原修復將達到*,。