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細(xì)胞裂解方法及細(xì)胞裂解液的特點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù)：1725 發(fā)布時(shí)間：2016-10-9
細(xì)胞裂解方法包括化學(xué)裂解、酶裂解和機(jī)械裂解,?；瘜W(xué)裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法，通常會(huì)很少使DNA斷裂,。這兩種方法（包括SDS和溶菌酶處理等）提取純化DNA中常用的方法。機(jī)械裂解可以更均一的裂解細(xì)胞,，同化學(xué)裂解相比,，機(jī)械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機(jī)械處理可以更劇烈和全面的裂解細(xì)胞,，但也會(huì)造成DNA的斷裂,。常用的方法是裂解液處理法
細(xì)胞裂解液的主要目的：1.利用去污劑破壞脂質(zhì)雙分子層,，破裂細(xì)胞；2. 溶解蛋白,；3. 蛋白變性使其穩(wěn)定,；4. 抑制蛋白酶活性
含有多種細(xì)胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非變性或變性條件下迅速裂解組織或培養(yǎng)細(xì)胞,，使之釋放出細(xì)胞內(nèi)蛋白,，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。它具有以下優(yōu)點(diǎn)：
1.快速裂解,，多種裂解成分經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,，能快速使細(xì)胞裂解。
2.能程度地保留蛋白天然結(jié)構(gòu)和功能,，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,，還可以用于蛋白活性檢測(cè)（信號(hào)傳遞研究和酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè)）和Western Blot等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3.裂解細(xì)胞的效率更高,，主要用于對(duì)抗原空間構(gòu)型不敏感的免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),，還可以用于Western Blotting。適用于培養(yǎng)細(xì)胞（包括懸浮細(xì)胞）和新鮮組織,。