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技術(shù)文章
細(xì)胞分離技術(shù)
點(diǎn)擊次數(shù):1411 發(fā)布時(shí)間:2016-9-21
離心是研究如細(xì)胞核,、線粒體,、高爾基體、溶酶體和微體,,以及各種大分 子基本手段,。一般認(rèn)為,轉(zhuǎn)速為10~25Kr/min的離心機(jī)稱為高速離心機(jī),;轉(zhuǎn)速超過25Kr/min,,離心力大于89Kg者稱為超速離心機(jī)。目前超速 離心機(jī)的zui高轉(zhuǎn)速可達(dá)100Kr/min,,離心力超過500Kg,。
在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級(jí)離心,用于分離不同大小的細(xì)胞和細(xì)胞器,。在差速離心中細(xì)胞器沉降的順序依次為:核,、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體,、zui后為核蛋白體。
由于各種細(xì)胞器在大小和密度上相互重疊,,而且某些慢沉降顆粒常常被快沉降顆粒裹到沉淀塊中,,一般重復(fù)2~3次效果會(huì)好一些。
差速離心只用于分離大小懸殊的細(xì)胞,,更多用于分離細(xì)胞器,。通過差速離心可將細(xì)胞器初步分離,常需進(jìn)一步通過密度梯離心再行分離純化,。