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西安東瑞科教實驗儀器有限公司
主營產品： 流量型蠕動泵,智能氫氣發(fā)生器,肉類安全檢測儀,肉類食品安全綜合分析儀,雞蛋新鮮度快速檢測盒 |
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2014-6-9 閱讀(4988)
目前的氯霉素等抗生素快速檢測,，主要有酶聯(lián)免疫法（ELISA）和膠體金免疫層析法。
膠體金法的特點是快速,、簡單,，無需實驗室器材和專業(yè)的操作人員，前處理簡單,，結果直觀,，常溫保存。國內有很多的廠家均有生產,，比如上?？祆`，北京六角體等?，F(xiàn)已廣泛應用于國內各大企業(yè),。
膠體金法只需將處理好的樣品加入稀釋液，攪拌均勻,，將混合好的檢測液滴入檢測卡中,，5~10分鐘即可根據(jù)卡上的出線情況判讀結果。
ELISA法反應原理
主要是利用抗原與抗體的特異性免疫化學反應的基本原理來進行的,。在整個反應當中,樣品中氯霉素含量越多,，反應呈色就越淡。反之,，樣品中氯霉素含量越少,，則呈色越深。
試劑盒組成
1,、微量測試孔：每條8孔,，每板12條
2、氯霉素標準溶液：
0ppb,、0.05ppb,、0.15ppb、0.45ppb,、1.35 ppb,、4.05 ppb，1.5ml/瓶
3,、10倍濃縮萃取稀釋液：一瓶,，30ml/瓶
4,、10倍濃縮洗滌液：一瓶，30 ml /瓶
5,、氯霉素酶標記物： 一瓶,，8 ml/瓶
6、底物溶液：一瓶,，12 ml/瓶
7,、反應終止液：一瓶，13 ml/瓶
使用說明
A,、注意事項
1,、使用前先將氯霉素標準溶液6瓶，濃縮萃取稀釋液,，濃縮洗滌液,，酶標記物，底物溶液及微量測試孔條置于室溫下,，回溫30分鐘,。
2、原倍萃取稀釋液及洗滌液配制
用蒸餾水將10倍濃縮萃取稀釋液及濃縮洗滌液分別以1： 9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水),，即可作為樣品萃取稀釋液與微孔板清洗液,。
3、回溫后,，取出所需微量測試孔條,，將剩余板條立即放回鋁箔袋中用膠帶封好，置于4o℃保存,。
B,、樣品制備
1.待測物為生乳，則依以下方法進行處理 (5倍稀釋)
取100ul待測生乳加入400ul萃取稀釋液,，振蕩混合后備用,。
2.待測物為蜂蜜,，則依以下方法進行處理
a.取2g蜂蜜,、4ml蒸餾水與2ml 乙酸乙酯置入離心管中，震蕩約5分鐘,，使其充分混合均勻,。
b.離心10分鐘(3000rpm)，取0.5ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中,，于50℃下氮氣吹干(溫度請勿超過50oC),。
c.加入0.5ml萃取稀釋液，震蕩約10秒鐘后備用,。
3. 待測物為血清,、則依以下方法進行處理
a.抽取待檢動物血液,，離心或靜置取其較透明之上層液(血清層)使用，注意不要有溶血,。
b.將3ml血清加入離心管中,，再加入6ml乙酸乙酯，震蕩混合約30秒,。
c.離心10分鐘(3000rpm),，取2ml上層液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮氣吹干,。
d.于此玻璃管中加入正己烷2ml,，先將殘余物*溶解后，再加入1 ml萃取稀釋液,，震蕩約30秒鐘,。
e. 離心10分鐘(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分,，棄掉,。再吸取下層液(水層)備用。
f.若有乳化現(xiàn)象,，請先將大部分上層液(正己烷)取出后,，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5~10分鐘,，可改善乳化情形,。
4. 待測物為雞肉或魚、蝦,，則依以下方法進行處理
a.將3克樣品剪碎后放入50 ml離心管中,，再加入6ml乙酸乙酯，并以均質機均質約1分鐘,，再震蕩約30秒,。
b.離心10分鐘(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中,，于50oC下氮氣吹干,。
c.于此玻璃管中加入正己烷2 ml，先將殘余物*溶解后(若未能*溶解,，可能會導致回收率降低),，再加入1 ml萃取稀釋液，震蕩約30秒鐘,。
d.離心10分鐘(3000 rpm),，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉,。再吸取下層液(水層)備用,。
e.若有乳化現(xiàn)象,，請先將大部分上層液(正己烷)取出后，再將玻璃管置入80oC水中,，隔水加熱約5~10分鐘,，可改善乳化情形。待測物為血清,、則依以下方法進行處理
5.待測物為內臟(肝,、心等)，則依以下方法進行處理(5倍稀釋)
同上述步驟a~d,，但下層液吸出后,，再以萃取稀釋液稀釋5倍(即下層液50ul加萃取稀釋液200ml)。
6.待測物為飼料,，則依以下方法進行處理(10倍稀釋)
同上述步驟a~d,，但下層液吸出后，再以萃取稀釋液稀釋10倍(即下層液30ul加萃取稀釋液270ml),。
C,、操作步驟
本產品的酶標記物與氯霉素標準溶液均直接使用，無需再稀釋,。
1,、于適當微孔中分別加入100mL標準溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2,、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液,。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標記物,。
4,、輕敲盤子四周，使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時,。
5,、將微孔中的反應液甩掉，再將洗液加滿每一微孔后甩掉,，重復洗3次,。
6、zui后一次甩掉后,，在吸水紙上拍干,。
7,、于每一微孔中加入底物溶液100mL后,，輕敲盤子四周，使其充分混合,。
8,、于室溫下避光靜置溫育20分鐘,。
9、于每一微孔中加入100mL反應終止液,。
10,、用酶標儀于波長450nm下判讀。
D,、判定
1. 計算B/B0值,。用樣品或標準液吸光度值(B)除以零標準吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值為縱坐標,，以標樣濃度的對數(shù)值為橫坐標,，做標準半對數(shù)曲線。
3. 根據(jù)每個樣品的B/B0值就可從曲線上讀出相對應樣品的濃度,。
4. 由于樣品經過了預先稀釋,，因此根據(jù)標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。
E,、標準曲線
F,、靈敏度
氯霉素試劑檢測盒的平均檢測下限為 0.05ppb，此濃度之吸光值與陰性標準溶液(0ppb)之吸光值有明顯的差異,。
G,、 特異性
針對以下抗生素進行交叉反應之測試，結果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1%
H,、再現(xiàn)性
針對氯霉素檢測試劑盒精密度測試,，重復6次，所得不同濃度標準溶液的吸光值變異系數(shù)(%CV).
I,、回收率
生乳(添加1.0ppb)104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb)90~110%
蝦及魚肉(添加0.5ppb)95~110%
雞肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb)100~120%
內臟(添加1.0ppb) 100~120%
飼料(添加2.0ppb)80~110%
氯霉素檢測試劑盒
簡介
氯霉素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素,。由于其具有效果好以及價格低廉等優(yōu)點，目前已被普遍應用于各類家禽,、家畜,、水產品及蜂制品的各種傳染性疾病的治療。然而氯霉素有其嚴重的副作用,它會抑制人體骨髓的造血功能,，從而引起再生障礙性貧血和粒細胞缺乏癥,。目前，我國已禁止其使用,。
簡化了樣品處理方式,，使用簡便，省時省力省錢,，整個操作過程不到90分鐘,。本產品檢測范圍廣(雞肉、魚、蝦,、蟹,、牛奶、血清,、肌肉,、組織、飼料與蜂蜜等),，回收率為80%－120%,，靈敏度可達到0.05ppb.
簡單
1． 樣品提取方便快捷。
2． 90分鐘得到結果,。
3． 只需基本的實驗室設備,。
4． 操作人員只需zui基本的實驗知識。
準確
1． 結果重現(xiàn)性高,。
2． 至0.05ppb,。
3． 與其它抗體的交叉反應率極低。
產品規(guī)格
包裝：每包96孔
靈敏度: 0.05ppb
測試區(qū)間：0.05ppb－4.05ppb
檢測時間：80分鐘(提取后)
儲存條件：2-8℃
氯霉素快速檢測試紙（48條/盒） 型號:DP1
氯霉素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素,。由于其具有效果好以及價格低廉等優(yōu)點,，目前已被普遍應用于各類家禽、家畜,、水產品及蜂制品的各種傳染性疾病的治療,。然而氯霉素有其嚴重的副作用,它會抑制人體骨髓的造血功能，從而引起再生障礙性貧血和粒細胞缺乏癥,。目前,，我國已禁止其使用。
氯霉素檢測試紙,，簡化了樣品處理方式,，使用簡便，,整個操作過程只須15分鐘,。靈敏度可達到3ppb
其原理為：在試劑片的 ‘中央判讀區(qū)’噴有2條隱形的線,上面一條為對照線(C線),，下面一條為測試線(T線)。若樣品中氯霉素的濃度小于3ppb,，則T線呈色與C線相近,；若樣品中氯霉素的濃度大于3ppb，則T線將比C線淺很多或*看不到線,，也就是說,，氯霉素濃度越高T線越淺。
簡單：
1． 成套的裝置,，提供準確一致的可視的結果
2． 適于現(xiàn)場檢測,。15分鐘得到結果,。
3． 操作人員只需zui基本的化驗知識。
準確：
1． 結果重現(xiàn)性高,。
2． 至3ppb,。
3． 與其它抗體的交叉反應率極低
：
我們?yōu)橛脩籼峁﹝ui方便,、快捷,、周到的服務。
產品規(guī)格
包裝：每包16片
靈敏度: 3ppb
檢測時間：15分鐘(提取后)
儲存條件：2-8℃
組成
本試紙組可進行16次實驗
1,、反應孔:2條16孔
2,、氯霉素指示劑：1瓶
3、檢測試紙片一筒 ：16片
4,、小吸管：24支
5,、樣品混合棒：20根
6、10倍濃縮稀釋緩沖液：1瓶
試紙使用說明：
A,、注意事項
1,、 試紙需要干燥保存，請隨時確保瓶蓋蓋嚴
2,、 測試環(huán)境溫度>20℃即可,。
3、盡量不要觸摸試紙片中央在白色膜面,。
4,、本試紙使用前，需先將整套組成部分在室溫中回溫30分鐘,，以確保反應的正確性,。
5、檢測一個樣品使用一個反應孔,，一片測試片及一支滴管,。未用完的氯霉素指示劑，可放回4℃冰箱留待下次再用,。未用過的微量測試孔,，隔次仍可使用。
6,、結塊或發(fā)臭的牛奶不適合檢測,。
7、原倍稀釋緩沖液配制：用蒸餾水將10倍濃縮稀釋緩沖液以1:9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水),，即可作為樣品稀釋液,。
B、樣品制備： 1.待測物為牛奶可直接進行檢測,。
2.待測物為蜂蜜,，則依以下方法進行處理：
以金屬勺取少量待測蜂蜜樣品置于火上加熱至沸騰,，用小細管趁熱吸取樣品（勿吸入氣泡），以稀釋緩沖液做1：3稀釋,。
3. 待測物為血清,、則依以下方法進行處理：
a.抽取待驗動物血液，離心或靜置取其較透明之上層液(血清層)使用,，注意不要有溶血,。
b將3ml血清加入離心管中，再加入6 ml乙酸乙酯,，震蕩混合約30秒,。
c.離心10分鐘(3000rpm)，取2ml上層液(乙酸乙酯)至玻璃管中,，于50oC下氮氣吹干,。
d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先將殘余物*溶解后,，再加入1 ml 稀釋緩沖液,，震蕩約30秒鐘。
e. 離心10分鐘(3000 rpm),，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分,，棄掉。再吸取下層液(水層)備用,。
f.若有乳化現(xiàn)象,，請先將大部分上層液(正己烷)取出后，再將玻璃管置入80oC水中,，隔水加熱約5～10分鐘,，可改善乳化情形。
4. 待測物為雞肉或魚,、蝦,，則依以下方法進行處理：
a.將3克樣品剪碎后放入50 ml離心管中，再加入6 ml乙酸乙酯,，并以均質機均質約1分鐘,，再震蕩約30秒。
b.離心10分鐘(3000rpm),，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中,，于50oC下氮氣吹干。
c.于此玻璃管中加入正己烷2ml,，先將殘余物*溶解后(若未能*溶解,，可能會導致回收率降低)，再加入1ml稀釋緩沖液,，震蕩約30秒鐘,。
d.離心10分鐘(3000 rpm),，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉,。再吸取下層液(水層)備用,。
e.若有乳化現(xiàn)象，請先將大部分上層液(正己烷)取出后,，再將玻璃管置入80oC水中,，隔水加熱約5~10分鐘，可改善乳化情形,。
5.待測物為內臟(肝,、心等),，則依以下方法進行處理(5倍稀釋)：
同上述步驟a～d,，但下層液吸出后，再以稀釋緩沖液稀釋5倍(即下層液100μl加 稀釋 緩沖液400ul),。
6.待測物為飼料,，則依以下方法進行處理(10倍稀釋)：
同上述步驟a～d，但下層液吸出后,，再以稀釋緩沖液稀釋10倍(即下層液100μl加 稀釋 緩沖液900ul),。
C、操作步驟：
(若樣品不只一份,，請先為樣品及反應孔做好對應編號)
1.以小吸管在微量測試孔中依次加入兩滴待測的樣品（以小吸管吸取時,，須將*滴滴除后，再進行實驗步驟）,。
2.充分搖勻氯霉素指示劑,，以新的滴管吸取氯霉素指示劑，滴去前兩滴,，加入一滴指示劑于待測樣品的測試孔,。
3.以手輕輕握住微孔，貼著桌面震蕩使其混合均勻約5分鐘,。
4.于每個測試孔中放入試紙片（白色端在下）,。
5.靜置10分鐘后判讀結果（判讀結果時間不要超過20分鐘）。
D,、判讀：
(由于樣品經過了預先稀釋,，因此所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù))
情形1—T線比C線深，或一樣深,，表示樣品中氯霉素濃度低于3ppb,。
情形2—T線比C線淡，表示樣品中氯霉素濃度高于3ppb,。
情形3—若C線*沒出現(xiàn),，則表示測試失敗,。
