在前述儀器工作原理部分,，我們已經指出,，液相色譜儀的分離是在色譜分離柱中實現(xiàn)的。我們目前工作中多采用反相色譜柱 ,，如何保護好分離柱減少柱的污染是延長柱壽命的關鍵,。

3．1          怎樣維護好色譜分離柱

加保護柱 （預柱 ）是保護分離柱的有效辦法。保護柱是根內裝填料與分離柱性質相近的短柱,，接在分離柱之前,，或代替流路過濾器。保護柱的作用是收集和阻塞分離柱 口的化學垃圾 ,，這些垃圾如果直接進入分離柱會逐漸堆積在柱頭,，更終降低柱效能,。保護柱是消耗品，如分析血漿樣品,，一般分析 50個樣品后需更換新柱芯,。避免高壓沖擊分離柱。一般色譜柱都能承受得起高壓,，但經不住突然變化的高壓沖擊,，這將改變柱床體積，影響柱效,。引起高壓沖擊的原因主要有：進樣器的樣品閥的緩慢轉動,、泵啟動太快、柱切換等操作,。用手動進樣閥時的壓力變化不大 ,，自動進樣閥由于切換較慢，可能會造成壓力沖擊,。合理選擇分離柱,。我們知道，選擇色譜分離柱主要根據兩點,，一是根據待測組分的分子量的大?。欢歉鶕鲃酉鄺l件,，包括 PH值,、離子強度和溶劑極性等。傳統(tǒng)硅膠基質的鍵合相柱要求流動相 PH值在 3—7之間,， PH值 （>8）的流動相能溶解硅膠,，使鍵合相流失。而目前利用先進的雜化顆粒技術研制的高純硅膠顆粒填料 （如 Waters公司的XTerra色譜柱 ）,，集硅膠和多孔聚合物填料的優(yōu)點為一體,，使有機硅烷單元取代了相當一部分占據顆粒內部和表面位置的硅羥基，使這種新型填料具有分辨率高,、穩(wěn)定性強,、PH范圍寬（1—12）的優(yōu)勢，其性能突破了傳統(tǒng)液相色譜柱的極限,。所以一定要根據分析的對象,、流動相的條件選擇合適的分離柱，茫然時可向公司的技術人員咨詢,。 定期沖洗分離柱,。每次分析工作結束時，沖洗完緩沖鹽后 ,，更后要過度到用強溶劑沖洗柱子 ,，如可用色譜純甲醇,、乙腈沖洗反相 C18柱，目的是沖去吸附在柱的強保留組分,。如果用甲醇 ／水為流動相也應這樣沖洗柱子,，在一定程度上可恢復柱效。

3．2 怎樣減少柱的污染?

更有效的辦法是純化樣品,。我們在多年的分析工作中發(fā)現(xiàn),，凡是樣品純化的越干凈，分離柱的壽命就越長反之,，只有提取沒有純化的樣品,，分離柱柱效下降較快建立一個理想的色譜分析方法應該有一套有效的樣品前處理方法，特別是在分析血漿和尿液樣品時,，要特別注意樣品的提取與純化 ,，盡量使處理過的樣品中雜質（如大分子蛋白、有機物等）降到更低,，保護柱頭和柱子,。提取純化好的樣品更好用流動相來溶解 ，一方面減少色譜圖中的溶劑峰干擾,，另一方面也是檢查樣品在流動相中的溶解性，如果樣品進樣后在流動相中沉淀,，會堵塞進樣器和柱頭,，甚至樣品分解，出現(xiàn)怪峰,。如果出現(xiàn)樣品與流動相不溶要設法改變溶解條件 ,，如更換樣品溶劑，或改進處理樣品的方法,，或過濾,，去除不溶性物質。