色譜柱由柱管、壓帽,、卡套（密封環(huán)）,、篩板（濾片）、接頭,、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,，壓力不高于70 kg/cm2 時,，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,。為提高柱效,，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光,。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,，其效果與拋光相同,。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細管柱,。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20µm（5~10µm）,，取決于填料粒度,，目的是防止填料漏出。

色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類,，尺寸規(guī)格也不同：

·         ①常規(guī)分析柱（常量柱）,，內(nèi)徑2~5mm（常用4.6mm，國內(nèi)有4mm和5mm）,，柱長10~30cm,；

·         ②窄徑柱（narrow bore，又稱細管徑柱,、半微柱semi-microcolumn）,，內(nèi)徑1~2mm，柱長10~20cm,；

·         ③毛細管柱（又稱微柱microcolumn）,，內(nèi)徑0.2~0.5mm；

·         ④半制備柱,，內(nèi)徑＞5mm,；

·         ⑤實驗室制備柱,，內(nèi)徑20~40mm,，柱長10~30cm；

·         ⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達幾十厘米,。柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長,、填料粒徑和折合流速來確定，目的是為了避免管壁效應(yīng),。

2,、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀,。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱,，以免柱性能損壞（添加5％的有機溶劑沖洗色譜柱，同時可以達到對緩沖鹽清洗的作用,。還可以使色譜柱更容易平衡）,。

3、流動相需脫氣后使用,，可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常,。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別，應(yīng)該使用過度分布的形式進行平衡,。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞,。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間,。

1、樣品應(yīng)當(dāng)盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中,。除特殊指明外,，如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。

2,、樣品溶液在進樣前應(yīng)使用針頭式過濾器對樣品預(yù)先過濾,。頻繁改變流動相組成，會加速降低柱效,。

3,、色譜柱由高壓勻漿法裝填，能承受較高壓力,。為獲得更佳分離效果,，使用時請不要超過200kgf，而且避免壓力突然上升或變化,，否則會造成硅膠填料的破壞,，減少色譜柱的使用壽命。除特殊要求外更高操作溫度不要超過60℃,。

2,、應(yīng)避免色譜柱受到直接的機械沖擊或摔落，避免造成色譜柱性能的降低,。

因強調(diào)分析速度而發(fā)展出短柱，柱長3~10cm,，填料粒徑2~3µm,。為提高分析靈敏度，與質(zhì)譜（MS）聯(lián)接,，而發(fā)展出窄徑柱,、毛細管柱和內(nèi)徑小于0.2mm的微徑柱（microbore）,。細管徑柱的優(yōu)點是：①節(jié)省流動相；②靈敏度增加,；③樣品量少,；④能使用長柱達到高分離度；⑤容易控制柱溫,；⑥易于實現(xiàn)LC-MS聯(lián)用,。
　　但由于柱體積越來越小,，柱外效應(yīng)的影響就更加顯著,，需要更小池體積的檢測器（甚至采用柱上檢測），更小死體積的柱接頭和連接部件,。配套使用的設(shè)備應(yīng)具備如下性能：輸液泵能精密輸出1~100µl/min的低流量,，進樣閥能準(zhǔn)確、重復(fù)地進樣微小體積的樣品,。且因上樣量小,，要求高靈敏度的檢測器，電化學(xué)檢測器和質(zhì)譜儀在這方面具有突出優(yōu)點,。

　色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外,，還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下,，填料粒度＞20µm時,，干法填充制備柱較為合適；顆粒＜20µm時,，濕法填充較為理想,。填充方法一般有4種：①高壓勻漿法，多用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充,；②徑向加壓法,，Waters；③軸向加壓法,，主要用于裝填大直徑柱,；④干法。柱填充的技術(shù)性很強,，大多數(shù)實驗室使用已填充好的商品柱,。
　　必須指出，液相色譜柱的獲得,，裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié),，但根本問題還在于填料本身性能的優(yōu)劣，以及配套的色譜儀系統(tǒng)的的結(jié)構(gòu)是否合理,。
　　無論是自己裝填的還是購買的色譜柱,，使用前都要對其性能進行考察,，使用期間或放置一段時間后也要重新檢查。柱性能指標(biāo)包括在一定實驗條件下（樣品,、流動相,、流速、溫度）下的柱壓,、理論塔板高度和塔板數(shù),、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性,，或分離度,。一般說來容量因子和選擇性因子的重復(fù)性在±5%或±10%以內(nèi)。進行柱效比較時,，還要注意柱外效應(yīng)是否有變化,。
　　一份合格的色譜柱評價報告應(yīng)給出柱的基本參數(shù)，如柱長,、內(nèi)徑,、填料的種類、粒度,、色譜柱的柱效,、不對稱度和柱壓降等。

色譜柱的正確使用和維護十分重要,，稍有不慎就會降低柱效,、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,，需要注意下列問題,，以維護色譜柱。
　　①　避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動,。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行,，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩（如前所述）,。
　　②　應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/span>
　　③　一般說來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會迅速降低柱效。
　　④　選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞,。有時可以在進樣器前面連接一預(yù)柱,，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠,，可使流動相在進入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
　　⑤　避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),，需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱,。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換,。
　　⑥　經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時,，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,，即常規(guī)分析需要50~75ml,。
　　下面列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序，作為參考：硅膠柱以正已烷（或庚烷）,、二氯甲烷和甲醇依次沖洗,，然后再以相反順序依次沖洗，所有溶劑都必須嚴(yán)格脫水,。甲醇能洗去殘留的強極性雜質(zhì),，已烷使硅膠表面重新活化。反相柱以水,、甲醇,、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次沖洗,，再以相反順序依次沖洗,。如果下一步分析用的流動相不含緩沖液，那么可以省略更后用水沖洗這一步,。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質(zhì),，在甲醇（乙腈）沖洗時重復(fù)注射100~200µl四氫呋喃數(shù)次有助于除去強疏水性雜質(zhì)。四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂,。有時也注射二甲亞砜數(shù)次,。此外，用乙腈,、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脫能除去蛋白質(zhì)污染,。
　　陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗，陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗,，除去交換性能強的鹽,，然后用水,、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有機物）,、甲醇,、水依次沖洗。
　　⑦　保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,，柱接頭要擰緊,，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間,。
　　⑧　色譜柱使用過程中,，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗,；另一種可能是大分子進入柱內(nèi)，使柱頭被污染,；如果柱效降低或色譜峰變形,，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大,。
　　在后兩種情況發(fā)生時,，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取凈）再把柱內(nèi)填料整平,。然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相（與柱內(nèi)相同）填滿色譜柱,，壓平，再擰緊柱接頭,。這樣處理后柱效能得到改善,，但是很難恢復(fù)到新柱的水平。
　　柱子失效通常是柱端部分,，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱（5~30mm）,，可以起到保護、延長柱壽命的作用,。采用保護柱會損失一定的柱效,，這是值得的。
　　通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上,。以硅膠為基質(zhì)的填料,，只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時間后,，可能有一些吸附作用強的物質(zhì)保留于柱頂,，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀Ｐ碌纳V柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降,，這時也可補加填料使柱效恢復(fù),。
　　每次工作完后，更好用洗脫能力強的洗脫液沖洗,，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡,。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時，使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗,。含鹵族元素（氟,、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,，不宜長期與之接觸,。裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用，應(yīng)每隔4~5天開機沖洗15分鐘,。

科技有限公司是一家多元化的高科技跨國公司,，它于1999年從惠普研發(fā)有限合伙公司分離出來，主要致力于通訊和生命科學(xué)兩個領(lǐng)域內(nèi)產(chǎn)品的研制開發(fā),、生產(chǎn)銷售和技術(shù)服務(wù)等工作,。
　　科技有限公司是分析儀器系統(tǒng)的領(lǐng)導(dǎo)供應(yīng)商，其產(chǎn)品正在化學(xué),、環(huán)保,、食品,、醫(yī)藥和生命科學(xué)領(lǐng)域中廣泛使用,。具有世界更先進的化學(xué)分析儀器，豐富的法規(guī)適應(yīng)性和專業(yè)技術(shù)經(jīng)驗,，以及優(yōu)良的支持服務(wù)系統(tǒng),，這些都能夠幫助您的實驗室超前應(yīng)對分析的挑戰(zhàn)。
　　創(chuàng)始人 威廉·休利特和戴維·帕卡德
　　年凈收入 51億美元（,？年）
　　員工人數(shù) 20,000（,？年）
　　總裁兼執(zhí)行官 邵律文[William P. （Bill） Sullivan]
　　總部所在地 美國加利福尼亞州 Santa Clara
　　電子測量
　　　的電子測量業(yè)務(wù)為客戶提供量身定制的、標(biāo)準(zhǔn)的電子電子測量儀器和系統(tǒng),，通信網(wǎng)絡(luò)和服務(wù)的監(jiān)測,、管理和優(yōu)化工具，以及用于電子設(shè)備和通信網(wǎng)絡(luò)和服務(wù)設(shè)計,、開發(fā),、制造、安裝,、部署和運營方面的軟件設(shè)計工具和相關(guān)服務(wù),。截至2005年10月31日，我們在電子測量業(yè)務(wù)領(lǐng)域的員工約為11,500。
　　市場：的電子測量業(yè)務(wù)所涉及的市場包括通信測試和綜合測試,。
　　產(chǎn)品領(lǐng)域：通信測試產(chǎn)品包括為下列類型的網(wǎng)絡(luò)和系統(tǒng)提供的產(chǎn)品：光線網(wǎng)絡(luò),、傳輸網(wǎng)絡(luò)、寬帶和數(shù)據(jù)網(wǎng)絡(luò),、無線通信和微波網(wǎng)絡(luò),。還對安裝、維護和運營支持系統(tǒng)提供幫助,。綜合測試產(chǎn)品包括綜合儀器,、模塊儀器和測試軟件、數(shù)字設(shè)計產(chǎn)品,、參數(shù)測試產(chǎn)品,、高頻電子設(shè)計工具、電子制造測試設(shè)備和薄膜電晶體陣列測試設(shè)備,。
　　生物分析測量
　　的生物分析測量業(yè)務(wù)提供以應(yīng)用為中心的解決方案,，其中包括能夠讓用戶識別、量化和分析物質(zhì)和產(chǎn)品的物理和化學(xué)屬性的儀器,、軟件,、耗材和服務(wù)。截至2005年10月31日,，我們在生物分析測量業(yè)務(wù)領(lǐng)域的員工約為4,000名,。
　　市場：生物分析測量業(yè)務(wù)所涉及的市場包括生命科學(xué)，其中包括藥物分析,、基因表達和蛋白質(zhì)組市場,，以及化學(xué)分析，其中包括石化,、環(huán)保,、國土安全、法醫(yī),、生物農(nóng)業(yè)以及食品安全市場,。
　　產(chǎn)品領(lǐng)域：生物分析測量業(yè)務(wù)的七大主要產(chǎn)品包括：微陣列、微流體,、氣相色譜,、液相色譜、質(zhì)譜,、軟件和信息學(xué),、以及相關(guān)耗材、試劑和服務(wù),。
　　實驗室
　　實驗室是的中心研究機構(gòu),，總部位于美國加利福尼亞州Santa Clara,，并在中國北京、美國華盛頓州Everett,、比利時Leuven,、以及英國蘇格蘭South Queensferry設(shè)有分支機構(gòu)。實驗室主要致力于從事兩大類型的研究：
　　1）針對能夠轉(zhuǎn)化為我們在通信,、電子,、生命科學(xué)和化學(xué)分析領(lǐng)域的現(xiàn)有業(yè)務(wù)的技術(shù)而進行的應(yīng)用型研究
　　2）針對創(chuàng)造在我們目前的市場之外，但屬于我們所關(guān)心領(lǐng)域的新業(yè)務(wù)而進行的研究,。實驗室同時也提供跨公司各個部門的技術(shù)整合,。
　　銷售和支持
　　主要通過直銷的方式銷售產(chǎn)品，但也同時通過分銷商,、轉(zhuǎn)銷商,、制造商代表、銷售和電子商務(wù)的方式進行銷售,。

作為世界上更大的測試測量公司,，為您提供的不僅僅是基本產(chǎn)品， 更有重現(xiàn)的結(jié)果

無論是研究工作還是常規(guī)的QA/QC檢測,，都有一種ZORBAX HPLC柱為您提供更佳解決方案,，幫助您更好地進行特定的檢測和純化應(yīng)用。 的ZORBAX色譜柱品種繁多,，包括 Rapid Resolution HT （1.8 µm） 和Rapid Resolution （3.5 µm） ,，更適用于高通量分析。 有適用于蛋白組學(xué)分離的色譜柱,，也有適用于放大純化規(guī)模的色譜柱,，共有800多種選擇，覆蓋了各種應(yīng)用范圍和條件,，能夠滿足各類分析應(yīng)用的需求,。