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血鉛檢測方法比較
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原子吸收光譜儀(CAAM-2001系列),、金屬套玻璃霧化器(WNA-系列),、氫化物發(fā)生器(WHG
血鉛檢測方法比較
目前*能夠測定血鉛水平的儀器和方法有:zui常用的是陽極溶出伏安法(ASV)和石墨爐原子吸收光譜法 (GFAAS)。
等離子體質(zhì)譜ICP-MS雖然可測定血鉛含量,,但因成本太高,,不適合做日常分析,只有一些專業(yè)實驗室才擁有這種設備,。
陽極溶出伏安法(ASV)作為成功測定血鉛濃度的檢測方法,,在國外應用已有30年多的歷史。用陽極溶出伏安法分析血鉛是在1971年提出,,其后顯示出它在微量測定中*的優(yōu)勢,。血液中的鉛離子,經(jīng)試劑處理,,釋放成游離的鉛離子,,當在電極中施加一定的負電壓時,所有的鉛離子將被還原成鉛且附著在電極上,,然后再在電極上施加更正的電壓,,電極上的鉛再電離成的鉛離子,并釋放一定的電子,,產(chǎn)生電流信號,。此電流信號與溶液中鉛濃度成比例關系,從而測定出鉛離子的濃度,。
美國ESA公司生產(chǎn)的3010B型血鉛分析儀使用的是轉(zhuǎn)換法,,即用含(CH3COO)2Ca、CrCl3,、Hg2+ 置換血蛋白中的2價鉛離子,,其主要優(yōu)勢在于分析速度的提高,并可以得到比較可靠的結(jié)果,。美國CDC項目的幾項比較結(jié)果顯示ASV和GFAAS的一致性很好,。
石墨爐原子吸收光譜法(GFAAS)是目前上*的檢測血鉛的標準方法之一。但石墨爐原子吸收光譜受光散射和分子吸收的影響較大,,此方法規(guī)定必須用塞曼背景修正系統(tǒng),,并保證用于分析鉛的波長穩(wěn)定在283.3nm。而且此方法對樣品處理和工作環(huán)境的要求很苛刻,,在操作時要注意以下幾點:
1. 在采血和對血樣進行處理過程中,,由于血樣是*暴露在環(huán)境中,因此一定注意環(huán)境中的鉛污染血樣(如空氣中微粒帶來的鉛污染,、使用了被污染的器具),。
2. 在采血后對血樣進行硝化,,硝化的作用是去除血液里的纖維素,使鉛以游離態(tài)的形式存在于溶液中,。處理過程中如使用的硝酸本身的鉛含量就很高,,甚至會高于血樣的鉛含量,因此有必要在使用硝酸對血樣進行硝化處理前先檢測硝酸的鉛含量并采取措施降低硝酸的鉛的含量,,避免血樣的二次污染,,假陽性的出現(xiàn)。
3. 在使用塞曼效應石墨爐原子吸收光譜來測定血鉛時必須要有專業(yè)技術人員來完成此操作過程,。
火焰原子吸收光譜法(AAS)用火焰原子吸收法做人體血鉛含量分析是一種舊的技術,,由于對人體產(chǎn)生影響的血鉛是微量的,使用火焰原子吸收光譜,,鉛的原子化率是非常低的,,即在實際操作中表現(xiàn)為基線漂移非常嚴重。因此它的靈敏度是達不到檢測人體血鉛的檢測范圍,,有可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,。火焰原子吸收在操作上受外部因素影響較嚴重,,尤其是人為因素的影響,,不同的人操作可能會得到不同的結(jié)果。同時,,由于在處理血樣的過程中是*暴露在環(huán)境(如空氣中微粒帶來的鉛污染,、使用了被污染的器具)中和血樣進行硝化處理過程中使用的硝酸本身的鉛含量過高,因此可能造成對血樣的二次污染,,會造成兒童實際血鉛水平較低而測量結(jié)果較高,,即假陽性現(xiàn)象出現(xiàn)。此方法基本上已被石墨爐原子吸收法所取代,。
紅細胞原卟啉法(EP)也稱為鋅卟啉法(ZPP)曾經(jīng)作為無癥狀兒童和其他高危人群的鉛篩查手段,。有數(shù)據(jù)表明,鋅原卟啉法(EP/ZPP)并無足夠的靈敏度和準確度測定低濃度的血鉛含量,,因而不再用于血鉛篩查,。鋅原卟啉法測定是用于說明由于鋅取代了在卟啉環(huán)中的鐵引起原卟啉含量增高(而此原因是由于鉛抑制了線粒體中的鐵絡合酶引起的)的一種方法。原卟啉只有在所有的循環(huán)的紅細胞*更新后才能達到穩(wěn)定的水平,,而達到此水平需要的時間為120天,且原卟啉的半衰期(68天)要比血中的鉛的半衰期(28-36天)要長,。鋅原卟啉法并不能表明檢測期血鉛的含量,,而只是一種對中度血鉛含量的間接的估計。依據(jù)大量的研究結(jié)果表明:鋅卟啉的含量通常低于35μg/dL,,體內(nèi)新增的原卟啉的濃度和血鉛水平只有在30-80μg/dL才成比例(Porru and Alessio 1996),。在血鉛濃度為10μg/dL-30μg/dL時,,用EP法檢測,其診斷的靈敏度和精度都是非常低的,。而這一血鉛水平已明確對兒童健康有害,。因此鋅原卟啉法的靈敏度不足以測定低血鉛水平中的鉛暴露狀況,所以用EP法檢測會造成兒童實際血鉛水平較高而測量結(jié)果較低,,易引起假陰性的結(jié)果,。在黃疸及缺鐵性貧血癥,鐮形血球及其他溶血性貧血癥病人中,,EP值會升高,,易引起診斷上的假陽性。所以,,此方法在應用于兒童血鉛的檢測上在國外已被禁止,,見CDC的1991版“防止兒童鉛中毒(Preventing Lead Poisoning in Young Children)”及美國衛(wèi)生和人類服務部有毒物質(zhì)和疾病注冊處健康教育和促進分部“鉛的毒害(Lead Toxicity)”一書(2000年10月改版本)。
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