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紫外分析儀的作用原理
閱讀：955 發(fā)布時(shí)間：2023-3-27
一,、系列分類：有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀,、可照相紫外分析儀等系列,，不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長引進(jìn)電泳分析,、檢測,，PCR產(chǎn)物檢測，DNA指紋圖譜分析,，紙層分析或薄層分析等,。
二、發(fā)展原理：熒光技術(shù)是某些物質(zhì)受一定波長的光激發(fā)后,，在極短時(shí)間內(nèi)(10-8秒)會(huì)發(fā)射出波長大于激發(fā)波長的光,，這種光稱為熒光。這一發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應(yīng)用及有關(guān)的方法稱為熒光技術(shù)(fluorescenttechnique),。
三,、第一種是自發(fā)熒光，如葉綠素,、血紅素等經(jīng)紫外線照射后,，能發(fā)出紅色的熒光，稱為自發(fā)熒光,；第二種是誘發(fā)熒光,，即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過紫外線照射發(fā)出熒光，稱為誘發(fā)熒光,。
四,、作用方法：
(1)定量測定：利用在較低濃度下熒光強(qiáng)度與樣品濃度成正比這一關(guān)系可以定量分析樣品中熒光組分的含量，常用于測定氨基酸,、蛋白質(zhì),、核酸的含量。熒光定量測定的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高,，例如維生素B2的測定可達(dá)1毫微克/毫升,，這一優(yōu)點(diǎn)使測定時(shí)所需要樣品量大大減少。
(2)這種定量測定方法還可應(yīng)用于酶催化的反應(yīng),，只要反應(yīng)前后有熒光強(qiáng)度的變化,，就可用來測定酶的含量及酶反應(yīng)的速率等。
(3)利用熒光壽命,、量子產(chǎn)率等參數(shù)可以研究生物大分子中的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象：通過該現(xiàn)象的研究,，可以獲得生物大分子內(nèi)部的許多信息。將一些特殊的熒光染料分子共價(jià)地結(jié)合或吸附在生物大分子的某一部位,，通過測定該染料分子的熒光特性變化來研究生物大分子,，這種染料分子被稱為“熒光探針”,，它們發(fā)出的熒光一般稱為外源熒光。