PCR儀的分類
閱讀:2808 發(fā)布時間:2017-9-5
根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為普通PCR儀,,梯度PCR儀,,實時熒光定量PCR儀,,原位PCR等幾類,。
1.普通PCR儀
普通PCR儀:一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀。假如要用它做不同的退火溫度則需要多次運行,。主要是用作簡單的,,對目的基因退火溫度的擴增。主要應(yīng)用于科研,、教學(xué),、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗,、檢疫等,。
2.梯度PCR儀
梯度PCR儀:一次性PCR擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的PCR儀。由于被擴增的不同的DNA片斷其的退火溫度不同,,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,,這樣既節(jié)約時間,,也節(jié)約經(jīng)費。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用,。多應(yīng)用于科研,、教學(xué)機構(gòu)。
3.實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),,就成了熒光定量PCR,。原理同普通PCR擴增儀,只是在PCR擴增時加進的引物是利用同位素,、熒光素等進行標(biāo)記,,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng),,得出量化的實時結(jié)果輸出,。熒光定量PCR儀有單通道,雙通道和多通道之分,。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候,選用單通道,;有多種熒光標(biāo)記的時候使用多通道,。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記和目的基因表達產(chǎn)物,由于一次只能檢測一種目的基因的擴增量,,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片斷的量,。主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測、生物醫(yī)藥研發(fā),、食品行業(yè),、科研院校等。
4.原位PCR儀
是用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴增儀。如病原基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等,??杀3旨?xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置進行基因擴增,。不但可以檢測到靶DNA,還能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置,。于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有著重大的實用價值,。