PURELAB flex可以清除內(nèi)毒素
閱讀:2099 發(fā)布時間:2015-12-1
URELAB flex(配ELGA生物過濾器)性能
規(guī)格
• 內(nèi)毒素 <0.001 EU/ml
• RNase <0.002 ng/ml
• DNase <20 pg/ml (<0.02 pg/μl)
• 細(xì)菌 <10 CFU/100ml(<0.1 CFU/ml)
PURELAB flex以純水或自來水做進水連續(xù)生產(chǎn)超純水,。 安裝ELGA LabWater生物過濾器后,,即可生產(chǎn)去除了生物活性雜質(zhì)的超純水。
去除了生物活性雜質(zhì)的超純水適于細(xì)胞培養(yǎng)等生物化學(xué)和分子生物學(xué) 應(yīng)用,。
內(nèi)毒素
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性活菌外膜脫落的脂多糖,。 細(xì)菌細(xì)胞死亡時釋放出內(nèi)毒素。
內(nèi)毒素與細(xì)胞相互作用,造成多種不利影響(參考文獻1 Dawson和參考文獻2 Nagano),。 內(nèi)毒素對試管內(nèi)受精(參考文獻3 Dumoulin)和細(xì)胞培養(yǎng)(參考文獻4 Stacey)等其他應(yīng)用影響很大,。
實驗(細(xì)胞分裂、電泳及其他生化工藝等)可靠性的提高得益于內(nèi)毒素的清除,。
在pH >2 時,,內(nèi)毒素帶負(fù)電,使用ELGA LabWater生物過濾器等帶正電過濾器可將其有效清除,。帶電的過濾器對水流構(gòu)成的障礙zui小,,作為純水系統(tǒng)的終端過濾器。
內(nèi)毒素挑戰(zhàn)實驗
對生物過濾器的挑戰(zhàn)實驗是向帶正電的過濾器進水中不斷注入高含量的內(nèi)毒素,,然后采用鱟變形細(xì)胞溶解物試驗(動態(tài)濁度法)測量產(chǎn)水中的內(nèi)毒素濃度,。
大多數(shù)的內(nèi)毒素挑戰(zhàn)實驗均要使用凈化的LPS。 ELGA LabWater的科研團隊從純水中已有的細(xì)菌中生產(chǎn)出自己的LPS,。 這是為了模仿逼真的挑戰(zhàn)實驗環(huán)境,。
首先從純水中分離出細(xì)菌。然后將細(xì)菌接種到蛋白胨水中,,在27℃的溫度下培養(yǎng),。對樣品反復(fù)進行加熱處理,用0.45μm過濾膜進行過濾,,由此得到濃縮的內(nèi)毒素,。
每個挑戰(zhàn)實驗持續(xù)5分鐘,得出以下總挑戰(zhàn)實驗結(jié)果:即使挑戰(zhàn)實驗超過了90 EU/ml,,總挑戰(zhàn)實驗接近800000 EU,,在生物過濾器后的產(chǎn)水中也未能檢測出內(nèi)毒素(<0.001EU/ml)。
實際上,,過濾器的進水中內(nèi)毒素的含量極低(<0.1EU/ml),。為了更逼真地模仿實際情況,以內(nèi)毒素含量為1EU/ml(標(biāo)稱)的純水做進水,,對生物過濾器做長時間的測試:在流過800升后仍未能檢出內(nèi)毒素(<0.001EU/ml),。
DNase與RNase
很多人擔(dān)心純水中可能存在RNase與DNase等其他生物活性雜質(zhì)。
純水中存在此類雜質(zhì)可能會給實驗帶來嚴(yán)重的干擾,。但是,,離子交換樹脂和紫外燈可將其去除。定期殺菌和維護的設(shè)計*的純水系統(tǒng),,其產(chǎn)水中不含此類雜質(zhì),。
本檢測使用增強版Ambion® Alert測試程序,該程序基于檢測可裂解熒光標(biāo)記RNase或DNase基質(zhì),。 測試結(jié)果表明RNase的檢測含量較低,,達到 <0.002 ng/ml,,DNase的含量為<20 pg/ml。即使此類雜質(zhì)很高,,PURElAB flex(配生物過濾器)也能有效地去除了RNase和DNase(RNase<0.002 ng/
ml,,DNase<0.02 ng/ml)。PURELAB flex(配生物過濾器)生產(chǎn)的純水可以替換限制使用二乙基焦碳酸(DePc)做水處理的情況(按照ELGA LabWater的建議,,其對殺菌與維護有限制),。
TOC與電阻率沖洗
在從設(shè)備的產(chǎn)水中清除任何內(nèi)毒素的同時,該生物過濾器必須不對水造成污染,。 新過濾器使用時,,快速電阻率與TOC沖洗十分方便;同時,,也清楚表明其對產(chǎn)水的污染會始終很低,。 這一點很重要,因為通過過濾器的產(chǎn)水純度是無法監(jiān)測的,。生物過濾器的TOC與電阻率快速沖洗如上圖所示,。
細(xì)菌挑戰(zhàn)實驗
在PURELAB flex內(nèi),純水循環(huán)流過紫外燈,,接受254和185nm的強紫外線照射,,將細(xì)菌含量控制在極低水平。采用具有0.2μm細(xì)菌過濾能力的生物過濾器將剩余的微量細(xì)菌清除掉,。在使用內(nèi)含1 x 107 CFU/ml的料液進行細(xì)菌挑戰(zhàn)實驗時,,生物過濾器*清除了細(xì)菌:等效于對數(shù)減少系數(shù)>8。
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