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液相色譜柱的分類

閱讀:1125        發(fā)布時間:2016-3-13

液相色譜柱的分類:(按色譜固定相基質(zhì)分)

.硅膠基質(zhì):

1.反相色譜柱:

反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相,。

反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,,緩沖液與甲醇,已腈等混合物,。

樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合zui先被沖出,,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。

常用的反相填料有C18(ODS),、C8(MOS),、C4(B)C6H5(Phenyl)等,。


2.正相色譜:

正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),,以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,,CPS)的鍵合相填料,。

由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性較強,因此,,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,,即極性強弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。

正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene  Chloride)等,。

3.離子交換色譜柱:以磺化交聯(lián)強陰/陽離子鍵合硅膠色譜柱,常用規(guī)格:強陰離子色譜柱(SAX),,強陽離子交換色譜柱(SCX)

.聚合物基質(zhì):

聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,,其主要優(yōu)點是在PH值為114均可使用。相對與硅膠基質(zhì)的C18填料,,這類填料具有更強的疏水性,;大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質(zhì)填料,,色譜柱柱效較低,。


.其他無機填料:

其它HPLC的無機填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì),,一般于特殊的用途,。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料,。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),,不再需其它的表面改性,該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強,,石墨化碳可用于分離某些幾何導構(gòu)體,,又由于HPLC流動相中不會被溶解,這類柱可在任何PH與溫度下使用,。氧化鋁也可用于HPLC,,

氧化鋁微粒剛性強,可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,,其優(yōu)點是可在PH高達12的流動相中使用,。

但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強,應(yīng)用范圍受到一定的限制,,所以未能廣泛應(yīng)用,,新型氧化鋯填料也可用于HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,,應(yīng)用PH范圍114,,溫度可達100。由于氧化鋯填料幾年才開始研究,,加之面臨的實驗難度,,其重要用途與優(yōu)勢尚在進行中。

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