分子雜交儀廣泛地使用于克隆基因的篩選,、酶切圖譜的制作,、基因組中定基因序列的定性,、定量檢測和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學(xué)域中具有廣泛地應(yīng)用,,而且在臨床診斷上的應(yīng)用也日趨增多,。
原理
分子雜交儀其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補(bǔ)關(guān)系形成雜交雙鏈分子。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成,。
核酸分子雜交是基因診斷的基本的方法之,。它的基本原理是:互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠行雜交,。這種結(jié)合是異的,,即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則行,它不僅能在DNA和DNA之間行,,也能在DNA和RNA之間行,。因此,當(dāng)用段已知基因的核酸序列作出探針,,與變性后的單鏈基因組DNA接觸時(shí),,如果兩者的堿基配對(duì),它們即互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈,,從而表明被測基因組DNA中含有已知的基因序列,。由此可見,行基因檢測有兩個(gè)條件,,是需的異的DNA探針;二是需的基因組DNA,。當(dāng)兩者都變性呈單鏈狀態(tài)時(shí),就能行分子雜交,。
操作步驟
1.接通電源打開開關(guān),,行參數(shù)設(shè)定。參數(shù)設(shè)定,,接通電源→按"選擇"鍵到相應(yīng)的參數(shù)行→按"設(shè)定"鍵,,該行位開始閃爍,入修改狀態(tài)→按"置數(shù)"鍵,,數(shù)字0~9循環(huán)到達(dá)所需的數(shù)字后按"移位"鍵到下位數(shù)字修改后,,按"設(shè)定"鍵確認(rèn)。按"選擇"鍵可選擇修改其他數(shù)據(jù)或回到正常顯示狀態(tài),。
2.達(dá)到所設(shè)定的溫度后按"運(yùn)行"鍵試運(yùn)行30min,。
3.按"停止"鍵然后將所要雜交的東西放到儀器內(nèi)按"運(yùn)行"鍵開始運(yùn)行,。