葉綠素測(cè)定儀主要是用于無(wú)損檢測(cè)植物葉綠素和葉面溫度，帶有上位機(jī)軟件能。
簡(jiǎn)介
?根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收,，利用分光光度計(jì)在某定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量,。根據(jù)朗伯—比爾定律,，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A＝αCL式中：α比例常數(shù),。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位,，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù),。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得,。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和,。這就是吸光度的加和性,。今欲測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類(lèi)胡蘿卜素的含量,，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)定波長(zhǎng)下的吸光度A,，并根據(jù)葉綠素a、b及類(lèi)胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度,。在測(cè)定葉綠素a,、b時(shí)為了排除類(lèi)胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的zui大吸收峰,。
原理
近年來(lái),隨著人們對(duì)農(nóng)業(yè)地區(qū)地表水和地下水污染的日益關(guān)注,如何準(zhǔn)確地對(duì)作物行氮肥變得越來(lái)越重要,。很多測(cè)試方法都包括土壤、植物采樣,樣品處理和室內(nèi)常規(guī)分析或田間簡(jiǎn)易設(shè)備測(cè)定等步驟,。其共同的不足之處就在于都要求樣品的采集和處理,從樣品采集到提供測(cè)試結(jié)果需要段時(shí)間,。另外許多大田作物在缺氮時(shí)會(huì)表現(xiàn)出些肉眼可見(jiàn)的癥狀,如玉米在缺氮脅迫下,氮從老葉向幼葉轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致老葉失綠;相反,供氮過(guò)量的植株,葉片顏色深綠,并且延遲作物衰老。通過(guò)觀測(cè)葉片顏色變化來(lái)評(píng)價(jià)作物氮營(yíng)養(yǎng)狀況已經(jīng)在中獲得應(yīng)用,。利用葉色作為施肥標(biāo)zui初是在水稻上開(kāi)始應(yīng)用,因?yàn)樵S多應(yīng)用于旱地作物的土壤和植株診斷方法不適合于水稻,。同時(shí)葉色也是水稻氮營(yíng)養(yǎng)敏感的標(biāo),葉色與葉片含氮量呈正相關(guān)。應(yīng)用葉色測(cè)定植物氮營(yíng)養(yǎng)狀況經(jīng)歷了幾個(gè)發(fā)展階段:①測(cè)定光的不同性;②通過(guò)常規(guī)浸提方法測(cè)定葉綠素含量;③利用標(biāo)準(zhǔn)比色卡葉色深淺;④測(cè)定光的通過(guò)率來(lái)反映葉色深淺,。水稻種植者常用肉眼觀測(cè)葉色變化來(lái)判斷是否缺肥,但是用目視方法來(lái)判斷綠色深淺受光線影響,屬于相對(duì)和非定量的方法,。Nadazui早利用光的發(fā)射比率來(lái)定量葉色，此后通過(guò)葉片顏色來(lái)預(yù)知植物氮素營(yíng)養(yǎng)狀況的研究越來(lái)越多,。而就在這時(shí),，種基于測(cè)定葉片葉綠素相對(duì)含量的便攜式葉綠素儀測(cè)量方法引起了大家的關(guān)注。隨著不斷的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,，葉綠素檢測(cè)儀已經(jīng)能夠很好的測(cè)定作物的氮肥缺失,，而且在水稻,、蘋(píng)果、棉花等作物上得到了廣泛的應(yīng)用,。
材料,、儀器設(shè)備及試劑
（）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。
（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì),；2. 電子載天平（感量0.01g）,；3. 研缽；5. 小漏斗,；6. 定量濾紙,；7. 吸水紙；8. 擦境紙,；9. 滴管,。
（三）試劑：96％乙醇（或80％丙酮）；石英砂,；碳酸鈣粉,。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物,，剪碎（去掉中脈）,，混勻。2. 稱(chēng)取剪碎的新鮮樣品0.2g,，共3份，分別放入研缽中,，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95％乙醇,，研成均漿，再加乙醇10ml,，繼續(xù)研磨至組織變白,。靜置3～5min。3. 取濾紙1張,，置漏斗中,，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中,，過(guò)濾到25ml棕色容量瓶中,，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次,，zui后連同殘?jiān)鸬谷肼┒分小?. 用滴管吸取乙醇,，將濾紙上的葉綠體色素洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止,。zui后用乙醇定容至25ml,，搖勻,。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95％乙醇為,，在波長(zhǎng)665nm,、649nm下測(cè)定吸光度。
四,、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.9665－6.88A649,；Cb=24.96A649－7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca,、Cb：mg/L）,，二者之和為總?cè)~綠素的濃度。zui后根據(jù)下式可步求出植物組織中葉綠素的含量：
葉綠素的含量（mg/g）= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）
儀器用途
葉綠素測(cè)定儀可以即時(shí)測(cè)量植物的葉綠素相對(duì)含量（單位SPAD）或綠色程度,、葉面溫度,，從而解植物真實(shí)的硝基需求量并且了解土壤硝基的缺乏程度或是否過(guò)多地施加了氮肥?？梢酝ㄟ^(guò)此款儀器來(lái)增加氮肥的利用率,，并可保護(hù)環(huán)境?？蓮V泛應(yīng)用于農(nóng)林相關(guān)科研單位和校對(duì)植物生理標(biāo)的研究和農(nóng)業(yè)的導(dǎo),。
能點(diǎn)
葉綠素測(cè)定儀TYS-A可同時(shí)測(cè)量葉綠素、葉面溫度兩個(gè)參數(shù),。
快速無(wú)損植物活體檢測(cè),，不影響植物成長(zhǎng)。
次操作可同時(shí)測(cè)定所有參數(shù),，實(shí)時(shí)顯示,，且可同時(shí)儲(chǔ)存
歷史數(shù)據(jù)查看，即可順序查看,，也可跳轉(zhuǎn)查看,。
歷史數(shù)據(jù)查看，即可順序查看,，也可跳轉(zhuǎn)查看,。
意外斷電后已保存在主機(jī)里的數(shù)據(jù)不丟失。
對(duì)于歷史數(shù)據(jù)即可逐條刪除,，也可以鍵式刪除,。
使用鋰電池供電，帶背光能,。
中英文鍵式切換,。
上位機(jī)軟件能（TYS-B型）
每種參數(shù)的報(bào)表、曲線圖均可選擇時(shí)段查詢查看,。
顯示每種參數(shù)過(guò)程曲線趨勢(shì),，zui大值,、zui小值、平均值顯示查看,，放大,、縮小能。
可將存儲(chǔ)記錄的數(shù)據(jù)以EXCEL格式備份保存,，方便以后調(diào)用,。
可將存儲(chǔ)記錄的數(shù)據(jù)曲線圖以BMP圖片格式備份保存，方便以后調(diào)用,。
