凝膠色譜柱的清洗和存放

閱讀：5145發(fā)布時間：2016-8-3

凝膠色譜技術(shù)是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡單,、操作方便,，不需要有機(jī)溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果,。

凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法,。凝膠色譜主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對分子質(zhì)量分布測試。目前已經(jīng)被生物化學(xué),、分子生物學(xué),、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,，不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究,，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。

那么,，凝膠色譜柱應(yīng)該如何進(jìn)行清洗和存放呢,？

1.色譜柱的清洗。為了不使被測物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后,，都應(yīng)及時地清洗色譜柱,。先要用對被測樣品洗脫能力強(qiáng)的溶劑來洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例,，因其先流出的物質(zhì)是極性大的物質(zhì),，此時應(yīng)用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質(zhì)洗脫下來,，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可,。如果流動相是緩沖溶液，則應(yīng)先用蒸餾水來沖洗色譜柱,，以沖掉柱內(nèi)的鹽,，然后再用合適的溶劑來沖洗。

2.色譜柱的存放,。如果色譜柱暫時不用,，存放時要注意以下幾點(diǎn)：a.幾天之內(nèi)的短期放置，凝膠柱則用蒸餾水來沖洗,，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可,。b.如果色譜柱長期不用，僅用上述方法來處理就不行了,，這時應(yīng)使用色譜柱使用說明書中所指明的溶劑來充滿色譜柱,，凝膠柱則不能用水了，因柱內(nèi)如果有微生物的生長則會使柱效降低,，此時應(yīng)用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來沖洗色譜柱,，再將色譜柱封嚴(yán)。色譜柱長期放置時,，一定要將色譜柱的兩端封嚴(yán),，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現(xiàn)象，因這可導(dǎo)致柱效的嚴(yán)重降低,。c.色譜柱應(yīng)貯存在室溫下,，如果放置于0℃以下的環(huán)境里，柱內(nèi)就會結(jié)冰,，這也將導(dǎo)致柱效的降低,。

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