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氨基酸分析法概述
閱讀：2011發(fā)布時(shí)間：2015-12-7
本法包括四種柱前衍生法，分別為異硫氰酸苯酯（PITC）法,、6-氨基喹啉－N－羥基琥珀酰亞氨基氨基甲酸酯 （AQC）法,、鄰苯二醛（OPA）和9-芴甲基氯甲酸甲酯（FMOC）法,、2,，4-二硝基氟苯（DNFB）法，以及一種茚三酮柱后衍生法,。不同的品種應(yīng)針 對(duì)自身所含的氨基酸種類(lèi)及各氨基酸的含量選擇適宜的氨基酸分析方法并做相應(yīng)的方法學(xué)驗(yàn)證,。
由于本法衍生過(guò)程中衍生溶液量較少，且容易揮發(fā),，外標(biāo)法極易出現(xiàn)較大的誤差,，建議采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定，內(nèi)標(biāo)的確定由 各品種項(xiàng)下規(guī)定,。在本法中,，由于半胱氨酸或胱氨酸的衍生產(chǎn)物不穩(wěn)定，因此對(duì)于含半胱氨酸或胱氨酸的樣品衍生后應(yīng)盡快測(cè)定,，或者在衍生前對(duì)半胱氨酸或胱氨酸 進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?，使其轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定地產(chǎn)物（如磺基丙氨酸或半胱氨酸-硫代丙酸）后再衍生測(cè)定，具體方法由各品種項(xiàng)下規(guī)定,。在測(cè)定過(guò)程中,，可根據(jù)所用的儀器、 色譜柱品牌,、色譜柱的長(zhǎng)度及要分離的氨基酸種類(lèi),，對(duì)流動(dòng)相的有機(jī)溶劑和洗脫梯度作適當(dāng)調(diào)整以獲得較好的分離度。
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