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鈣離子探針

Ca2+作為細胞內(nèi)的第二信使,，調(diào)控著許多重要的生理活動。在與Ca2+結(jié)合條件下,，熒光探針顯現(xiàn)出光譜響應(yīng),；這使研究者可以通過利用熒光顯微鏡、流式細胞儀,、熒光分光鏡和熒光分光儀等來研究細胞內(nèi)部游離的Ca2+濃度的變化,。而Fluo-3結(jié)合鈣離子后的吸收波長為506nm，發(fā)射波長為526nm（綠色）,。因為常被用488型激光發(fā)生器激發(fā),，激發(fā)波的長波長降低了背景的干擾，因此是使用廣泛的熒光探針之一,。

Fluo-3的保存和溶解：

1）收到貨后,，應(yīng)置于-20℃保存。

2）推薦用DMSO溶解探針，溶解前應(yīng)將DMSO 和Fluo3均在室溫平衡,。溶解過程較慢,，請保持足夠的溶解時間。如果要長期保存,，請用無水DMSO溶解,，溶解后的儲液密封置于-20℃保存。同樣儲液在每次開蓋前都要置于室溫平衡,，以避免水汽凝結(jié)在長期保存中,，造成探針?biāo)狻Ｒ话阃扑]的儲液濃度為1-5mM,，工作液濃度一般為：1-5 µM,。為了防止出現(xiàn)較高背景及非特異性染色，探針的終濃度要盡可能低,。

3）公司在每次發(fā)貨時,，都給客戶提供免費的F-127助溶劑，用于探針溶解,。如果用純的DMSO長時間溶解不了,，請配制20%的F127 DMSO溶液，加速溶解,。

Fluo-3和Fura-2的區(qū)別：

Fluo-3和Fura-2相比,，其優(yōu)點是：一方面可以被氬離子激光（argon-ion laser）的488nm激發(fā)光激發(fā)，便于檢測,；另一方面,，Fluo-3和鈣離子結(jié)合后熒光變化更強，即對鈣離子濃度變化的檢測更加靈敏,；同時,，Fluo-3和鈣離子的結(jié)合能力較弱，這樣可以比Fura-2檢測到細胞內(nèi)更高濃度的鈣離子水平,；此外,，對于細胞內(nèi)的鈣離子的即時變化反應(yīng)得更加準(zhǔn)確，減小了因為和鈣離子解離速度慢而導(dǎo)致的熒光變化滯后,。Fluo-3廣泛地用于流式細胞術(shù)和激光共聚焦顯微掃描中,。

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