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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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高質(zhì)量核酸提取,,用TA就對(duì)了!

時(shí)間:2021/12/29閱讀:943
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核酸提取和純化,,對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響


早在公元前2-3世紀(jì),,中國(guó)和印度就有了關(guān)于病毒所導(dǎo)致的疾病---天花的記錄,,直到19世紀(jì)末,病毒才開(kāi)始逐漸被發(fā)現(xiàn)和鑒定,。目前,,對(duì)于NCP疫情的檢測(cè),使用體外診斷核酸檢測(cè)方法仍是*的手段,。

 

核酸是分子生物學(xué)的基礎(chǔ),,而核酸提取是核酸檢測(cè),,乃至于整個(gè)分子行業(yè)繞不過(guò)去的門(mén)檻,很多時(shí)候一份樣本的核酸提取的好壞直接決定了檢測(cè)結(jié)果的有效性,。

 

核酸提取的主要步驟:

 

01裂解細(xì)胞

去除與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)以及多糖、脂類(lèi)等生物大分子,,去除其他不需要的核酸分子,,如提取DNA分子時(shí),,應(yīng)去除RNA,反之亦然,。

 

02沉淀核酸

純化核酸,去除鹽類(lèi),,有機(jī)劑等雜質(zhì),一般可以把核酸提取方式主要分為三類(lèi):溶液型抽提,,柱式抽提,磁珠純化法。

 

隨著基因檢測(cè),、個(gè)性化給藥等普及,,生物行業(yè)各個(gè)領(lǐng)域都追求高通量、高純度的今天,,磁珠法純化提取核酸的優(yōu)勢(shì)更加明顯 磁珠技術(shù)作為是運(yùn)用較為廣泛的核酸提取方式,。磁珠法與PCR法聯(lián)合使用,在高效提取核酸的同時(shí),,使氣溶膠污染概率大大降低,,能有效防止實(shí)驗(yàn)容易出現(xiàn)假陽(yáng)性的問(wèn)題,。

 

說(shuō)到磁珠法,那我們首先當(dāng)然必須得了解磁珠,,什么是磁珠呢,?磁珠是利用一定的組織包被四氧化三鐵核心而形成的可以被磁鐵吸附的同時(shí)有能通過(guò)表面包被物吸附(結(jié)合)核酸的神奇的小珠子。

 

▲ 磁珠法核酸提取原理示意圖

 

磁珠法是通過(guò)裂解液裂解細(xì)胞組織樣本,,從樣本中游離出來(lái)的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附攜帶核酸的磁珠移動(dòng)至不同的試劑槽內(nèi),,通過(guò)反復(fù)快速攪拌,、混勻液體,,經(jīng)過(guò)細(xì)胞裂解、核酸吸附,、洗滌與洗脫等步驟,,終得到純凈的核酸,。核酸純化的方法是影響所提取核酸質(zhì)量的重要因素,只有高質(zhì)量的核酸才能滿足下游的各種應(yīng)用,。

 

如何獲得更優(yōu)質(zhì)的核酸提取結(jié)果,?


除了選擇合適的提取方式,嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作之外,,無(wú)菌,、高品質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室小耗材也值得精心挑選!SP Bel-Art為DNA/RNA濃縮純化過(guò)程提供必要的工具,,保證提取核酸的質(zhì)量,。

 

01研磨組織相關(guān)產(chǎn)品

ProCulture微量均質(zhì)器-手持式

快速處理一對(duì)多樣品的理想選擇,,配套的塑料研棒無(wú)DNase,,RNase,。

 

 

液氮冷卻微型研缽和研杵套件

通過(guò)在微型離心管中均勻化來(lái)保護(hù)樣品質(zhì)量,,減少樣品損耗和采集時(shí)間,。

 

02核酸提取相關(guān)產(chǎn)品

磁珠分離架

可拆卸套管,,更有效地傳輸液體,;50ml和15/5ml型號(hào)的獨(dú)立管套使液體的添加和去除更容易,;不同規(guī)格可供選擇:1.5ml至50ml型號(hào)的管套上的彈簧柱塞允許珠子沿管壁以不同高度分離;

 

Flowmi™細(xì)胞過(guò)濾器

過(guò)濾原代培養(yǎng)物時(shí)盡量減少樣品損失,使用方便防止污染,。

 

ProCulture®軌道振動(dòng)平臺(tái)

把你的攪拌器變成軌道搖床。

ProCulture®37°C恒溫板

在培養(yǎng)箱外保持理想的細(xì)胞溫度。培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱外放置更長(zhǎng)時(shí)間,;保護(hù)細(xì)胞活力,;減少細(xì)胞壓力,使胰蛋白酶等酶有效地發(fā)揮作用,。

ProCulture®-1°C冷凍控制器

易于使用,可控制冷凍速度,,大約每分鐘-1°C;適用于1.0/1.8ml的試管,,18位。

 

03核酸純化相關(guān)產(chǎn)品

PrepSafe微型離心管微型浮動(dòng)架

在工作臺(tái)上工作,,在水浴中漂?。浑x心管被緊密地固定,,確保不會(huì)彈出,;將支架的支腿壓在工作臺(tái)上,,可松開(kāi)管子,便于拆卸,;開(kāi)放式支架使試管與水接觸多,,以便更好地控制樣品的溫度,。

 

關(guān)于SP Bel-Art

SP Bel-Art隸屬于SP Scientific集團(tuán),公司坐落于美國(guó)新澤西州,,自1946年創(chuàng)立以來(lái),開(kāi)發(fā),,開(kāi)創(chuàng)了實(shí)驗(yàn)室使用塑料設(shè)備的先河,,生產(chǎn)制造的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和耗材廣泛應(yīng)用于制藥,、生命科學(xué),、生物技術(shù)、教育,、食品,、醫(yī)療保健和石化等行業(yè),,現(xiàn)有產(chǎn)品超過(guò)10,000種,,為客戶提供全面的選擇,產(chǎn)品廣泛銷(xiāo)往美洲,、歐洲、亞洲、非洲,、澳洲等多個(gè)國(guó)家和地區(qū),。Bel-Art產(chǎn)品經(jīng)過(guò)反復(fù)的實(shí)踐檢驗(yàn),以高質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)為廣大用戶提供多方位的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),。作為SP旗下的一個(gè)成員,Bel-Art致力于為客戶提供更多創(chuàng)新性,、更有價(jià)值的產(chǎn)品,。


SP Bel-Art主打產(chǎn)品

 

細(xì)胞過(guò)濾器

保存小體積樣品,,避免流式細(xì)胞儀堵塞


安瓿瓶開(kāi)瓶器

杜絕試劑污染,安全方便開(kāi)啟安瓿瓶

無(wú)菌取樣工具

FD*別適用于生物制藥行業(yè),,伽馬射線滅菌,無(wú)需進(jìn)行昂貴的清潔驗(yàn)證

生物危害處理

高壓滅菌處理生物危害垃圾

干燥器

款式豐富,,合理化實(shí)驗(yàn)室空間

磁力攪拌子

種類(lèi)繁多,適用于各種攪拌實(shí)驗(yàn)

常用管架

試管架,、離心管架等

溫度計(jì)

涵蓋各種玻璃液體、電子和雙金屬溫度計(jì)

比重計(jì)

波美計(jì),、密度比重計(jì),、酒精比重計(jì)等

試劑瓶

帶GHS標(biāo)簽的安全洗瓶、試劑瓶等

移液器和附件

各種款式移液產(chǎn)品

生命科學(xué)相關(guān)產(chǎn)品

磁珠分離架,、96孔PCR板,、研磨器、克隆環(huán)等

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