分光光度計,,又稱光譜儀(spectrometer),,分解為光譜線的科學(xué)儀器,。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。
分光光度計作為一種精密儀器,,在運(yùn)行工作過程中由于工作環(huán)境,操作方法等種種原因,,其技術(shù)狀況必然會發(fā)生某些變化,,可能影響設(shè)備的性能,甚至誘發(fā)設(shè)備故障及事故,。因此,,分析工作者必須了解分光光度計的基本原理和使用說明,并能及時發(fā)現(xiàn)和排除這些隱患,,對已產(chǎn)生的故障及時維修才能保證儀器設(shè)備的正常運(yùn)行,。
1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用,。量瓶,、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用,。
2、取吸收池時,,手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),,裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時應(yīng)加蓋,,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,,檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意方向相同,。用后用溶劑或水沖洗干凈,,晾干防塵保存。
3,、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4,、測定時除另有規(guī)定外,,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi),,測幾個點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,,并以吸收度zui大的波長作為測定波長,,除另有規(guī)定外吸收度zui大波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
6,、供試品應(yīng)取2份,,如為對照品比較法,對照品一般也應(yīng)取2份,。平行操作,,每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
7,、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),,對于大部分被測品種,,可以使用2nm縫寬。