安捷倫XDB-C8液相色譜柱

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Agilent ZORBAX Eclipse XDB 色譜柱（C18,、C8,、苯基和氰基）提供四種鍵合固定相，用于方法開發(fā)優(yōu)化,。這些色譜柱可在寬pH 范圍(pH 2-9) 內(nèi)提供良好的峰形,，用一系列色譜柱可進(jìn)行靈活的其他方法開發(fā)。Eclipse XDB 色譜柱可以在低pH (2-3) 條件下用于方法開發(fā),，且同樣的色譜柱還可以在中等pH (6-8) 范圍內(nèi)用于方法開發(fā),。在中等pH 范圍內(nèi)，殘留硅醇基活性更大,，且更容易發(fā)生相互作用,，造成峰拖尾。為了克服這些相互作用,，Eclipse XDB 色譜柱通過工藝進(jìn)行超密鍵合和雙封端,，以覆蓋盡可能多的活性硅醇基。zui終堿性化合物在pH 2-9 范圍內(nèi)具有出色的峰形,?？商峁┝綖?.8、3.5,、5 和7um 的Eclipse XDB 色譜柱,，實(shí)現(xiàn)高速、高分離度,、分析和制備放大分離,。

ZORBAX Eclipse XDB-C8

ZORBAX Eclipse Plus C8 柱有幾種填料粒徑和柱尺寸，是提高效率的良好工具,。它們分離酸性,、中性和堿性化合物都有良好的峰形。是方法開發(fā)的*色譜柱,。

Eclipse Plus C8 的選擇性

色譜柱的選擇要考慮到一些因素,。選擇性是進(jìn)行色譜柱選擇zui重要的因素之一。選擇性系數(shù)(α)是兩個峰的

相對保留值：α = k2 / k1在這里k2 和k1 分別是第二個洗脫出來的峰和*峰的保留因子,，也稱容量因子,。如果這兩個峰一起被洗脫，α 為1 ,；對這兩個緊密相鄰的峰來說,，選擇性接近１。選擇性,，或峰間距,，可以通過改變溫度,、流動相或固定相（色譜柱）進(jìn)行調(diào)節(jié)。因?yàn)檫x擇性體現(xiàn)了分析物與固定相/流動相之間的相互作用,，所以難以理解,、也很難預(yù)測，常常需要通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,。有各種柱子可供選擇,，這是改變α的有力而容易的辦法，尤其是因穩(wěn)定性,、溶解度,、pH 或其它局限無法改變流動相時。圖1 顯示了在同樣的色譜條件下,，Eclipse

Plus C8 柱,、Eclipse Plus C18 柱，和Eclipse XDBC8 柱的不同選擇性,。Eclipse Plus C8 柱與EclipseXDB-C8 柱相比,，雖然對三種非常難分離的化合物來說，α僅改變了6%,，但分離度增加了1 倍,，從1.23 增至2.42。

這些柱子都有相似之處,，如，同樣以ZORBAX硅膠為基質(zhì),，都采用的是安捷倫控制的生產(chǎn)技術(shù),，因此，可以預(yù)

計(jì)其洗脫順序也比較相似,，如圖所示,。但它們之間也有明顯的不同，例如,，Eclipse Plus 柱和Eclipse XDB 柱采用的的硅膠處理和鍵合技術(shù)不同,，C18 和C8的官能團(tuán)也不同。這些差異反映為選擇性的不同,，進(jìn)而將改善分離度,。對于a接近1 的緊密相鄰峰，a的微小變化將對分離度產(chǎn)生極大的影響,，例如在這安捷倫XDB-C8液相色譜柱

個例子中,，a 從1.07變?yōu)?.14，分離度就從1.15 增加到2.42,。

堿性化合物的出色峰形

Eclipse Plus 柱（C8 和C18）的zui顯著的特點(diǎn)是分離各種類型樣品：酸性,、堿性和中性樣品,，都能得到出色的峰形。在上述例子的各圖中都列出了用美國藥典拖尾因子計(jì)算表示的峰形,。每個例子中,，都接近于理想狀態(tài)(1.0)。高性能+峰形,，柱效和分離度+均歸功于全程嚴(yán)格控制的,、改進(jìn)的硅膠生產(chǎn)和鍵合技術(shù)。堿性化合物（特別是含氨基的分子）的高效反相色譜分離經(jīng)常很困難,。在低pH條件下(pH ＜ 3),，堿發(fā)生質(zhì)子化(BH+)，因而水溶性很強(qiáng),，保留較差,。在pH 7時，某些氨基可能仍然質(zhì)子化,，而其它的則失去其質(zhì)子(B),。硅膠上沒有反應(yīng)*的硅醇基呈離子型(SiO-)，將與質(zhì)子化的離子樣品發(fā)生相互作用,。這種離子交換二級反應(yīng)將導(dǎo)致峰拖尾,。在低pH 條件下，硅醇基未離子化(SiOH),，與堿性分析物不發(fā)生相互作用,。Eclipse Plus進(jìn)行了*的ZORBAX硅膠處理、封端和鍵合,，降低了離子化硅醇基的相互作用,，顯著改善了峰形。