看圖例學習二手液質(zhì)聯(lián)用儀檢測流程
如今蛋白組/代謝組學被廣泛應用于生命科學領域,,液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(液質(zhì)聯(lián)用)是蛋白組/代謝組學研究的主要手段,因此液質(zhì)聯(lián)用受到了醫(yī)學科學們非常大的重視,。京科瑞達二手儀器為您提供各品牌進口 二手液質(zhì)聯(lián)用儀 以及售后質(zhì)保等服務套餐,。
液質(zhì)聯(lián)用儀是將液相色譜儀與質(zhì)譜儀聯(lián)用的儀器,用于樣品定性定量分析,。其特點是將應用范圍非常廣的液相色譜分離方法與靈敏,、專屬、能提供分子量和結構信息的質(zhì)譜法結合起來的一種現(xiàn)代分析技術,。
液質(zhì)聯(lián)用技術原理悉知:
樣品通過液相色譜分離后的各個組分依次進入質(zhì)譜檢測器,,各組分在離子源被離子化,產(chǎn)生帶有一定電荷,、質(zhì)量數(shù)不同的離子,。不同離子在電磁場中的運動行為不同,采用質(zhì)量分析器按不同質(zhì)荷比(m/z)把離子分開,,得到依質(zhì)荷比順序排列的質(zhì)譜圖,。通過對質(zhì)譜圖的分析處理,可以得到樣品的定性和定量結果,。
液相色譜分析的一般流程圖解
液相色譜部分由進樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)三個部分組成
(1)進樣裝置要求密封性好,,死體積小,,重復性好,保證中心進樣,,進樣時對色譜系統(tǒng)的壓力,、流量影響小。
(2)輸液系統(tǒng)主要的是梯度洗脫裝置——有兩種方式:一種稱低壓梯度,指常壓下溶劑按一定比例混合后再由高壓泵輸入色譜柱,,又稱外梯度,;另一種稱高壓梯度,指先用高壓泵將各溶劑輸入混合器混合,,再送入色譜柱,,也稱為內(nèi)梯度。
(3)分離系統(tǒng)包括色譜柱,、連接管和恒溫器等,。與單純LC相比,LC-MS一般流速較低(高流速可能影響霧化效果),,所以一般用窄徑柱,,即2 mm或2.1mm的,粒徑一般為3.5μm,,也有1.7μm的,。
質(zhì)譜的電離與質(zhì)量分析流程圖解
(1)ESI電離:其工作原理是將液滴變成蒸汽,產(chǎn)生離子發(fā)射的過程中形成的溶劑由液相泵輸送到ESI Probe,,經(jīng)其內(nèi)的不銹鋼毛細管流出,,這時給毛細管加2-4 kv的高壓,由于高壓和霧化氣的作用,,流動相從毛細管頂端流出時,,會形成扇狀噴霧,使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠,。ESI屬于zui軟的電離方式,,通常只產(chǎn)生分子離子峰。適合熱不穩(wěn)定的極性分子,,能分析小分子及大分子。
(2)四極桿質(zhì)量分析器:四極桿內(nèi)所包圍的空間存在雙曲線形電場,。從離子源入射的加速離子穿過四極桿中的電場會受到電場作用,,只有選定的m/z離子以限定的頻率穩(wěn)定的通過四極桿質(zhì)量分析器,其他離子則碰到極桿上被吸濾掉,,不能通過,,即達到“濾質(zhì)”的作用。四極桿質(zhì)量分析器結構緊湊,,體積小,,掃描速度快,適用于LC-MS聯(lián)用儀,。
液質(zhì)聯(lián)用儀檢測流程總結
所謂液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜實驗,,就是通過液相色譜把要分析的混合物分離開,再用質(zhì)譜對某個或某些分子進行定性或定量,。它的強大功能使之不僅能輕松面對單個分子的研究,,更加適合針對于復雜樣本的“組學”分析,。由于蛋白質(zhì)和小分子性質(zhì)的差異,面向蛋白組學和代謝組學的液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)也有所區(qū)別,,我們將在后續(xù)的篇幅中介紹液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)在各類學研究中的應用,,敬請期待。