發(fā)生凋亡的細胞,,其表面的微絨毛消失,并逐步脫離與周圍細胞的接觸,。形態(tài)上,,凋亡細胞首先變圓,與鄰近細胞脫離,,失去微絨毛,,胞質脫水濃縮,胞膜迅速發(fā)生空泡化(bleb-bing),,細胞體積逐漸縮小,,出現(xiàn)固縮(condensation),內質網(wǎng)擴張呈泡狀并與細胞膜融合,,形成膜表面的芽狀突起,,稱為出芽(buding)。晚期,,核染色質高度濃縮融合成團狀,,核染色質密度增高呈半月形或馬蹄形分布,并凝集在核膜周邊,,稱為染色質邊集(margination),。核仁裂解,進而胞膜皺縮內陷,,自行分割為多個外部有膜包裹的,、內含物不外泄的泡狀小體,稱為凋亡小體(apoptosis body),,最終被鄰近細胞所識別,、吞噬消化,或自然脫落而離開生物體,。
其DNA迅速被核酶所降解,,產生若干個大小不同的寡核苷酸碎片,在瓊脂糖凝膠電泳上呈現(xiàn)階梯狀核蛋白區(qū)帶圖譜,。由于酶切的位點在核小體處,,而核小體的核苷酸為180bp,所以產生不同倍數(shù)的180~200個堿基對的核酸片段電泳區(qū)帶,。但在整個過程中,,線粒體內的 DNA并不發(fā)生斷裂。
由于這種死亡過程沒有溶酶體酶及胞膜破裂,,所以,,細胞內涵物不外泄。近年來的研究發(fā)現(xiàn),,凋亡細胞表面有糖蛋白的末端唾液酸殘基發(fā)生丟失,,膜磷脂層不對稱性被破壞﹑磷脂酰絲氨酸暴露等改變,,均可以促使吞噬細胞對凋亡細胞的識別,,凋亡時常常無炎癥反應也正是因為這個緣故,,因此長期以來凋亡一直未引起人們的重視。
通過流式細胞儀等方法觀察發(fā)現(xiàn),,凋亡與死亡有明顯的差異(表21-1),,凋亡細胞具有以下特征:①由于細胞核酸內切酶激活,,使DNA特征性熒光染色減少,。②細胞質膜保持一定的完整性。③線粒體跨膜電位下降,。④保留ATP依賴的溶酶體質子泵,。⑤細胞蛋白含量明顯減少,,系由內源性蛋白酶被激活,蛋白質酶解增加所致.⑥在胸腺細胞,,凋亡發(fā)生在G,。期。⑦光吸收減少,,直角散射不變(HL-60細胞)或增加(胸腺細胞),。
細胞凋亡的發(fā)展包括兩個不同時期:
(1)致死前期(prelethal stage):是凋亡時細胞損傷的早期,具有可逆性,,此時出現(xiàn)細胞皺縮,、核染色質固縮、胞質中含空泡等變化,,最后出現(xiàn)線粒體腫脹,。
(2)致死期(lethal stage):凋亡細胞進入死亡階段,此時變化不可逆,,出現(xiàn)質膜連續(xù)性破壞和染色質嚴重固縮,、融化及腫脹的線粒體中絮狀集結和(或)鈣化。這常常見于脫落的凋亡細胞中,,或吞噬了致死前期空泡片段的鄰近細胞的溶酶體中,。
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