內(nèi)毒素與補(bǔ)體：補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)的介紹

補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)傳統(tǒng)分為經(jīng)典途徑和旁路途徑,，近年來(lái)按照其功能將補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)分為三個(gè)部分,。

1.第一前端反應(yīng)

第一前端反應(yīng)指由C1到C3的反應(yīng)順序,，也稱(chēng)C1途徑，即傳統(tǒng)的或經(jīng)典的補(bǔ)體激活途徑的前端部分,。參與的補(bǔ)體成分為C1（C1q,、C1r、C1s）,、C4,、C2及C3,，受到C1抑制物（C1-in）等因子的調(diào)節(jié)。

2.第二前端反應(yīng)

第二前端反應(yīng)由C3,、C3b,、B因子，D因子等幾個(gè)成分參與,，受備解素（P）等的調(diào)節(jié),，也稱(chēng)備解素系統(tǒng)、C3旁路,、替代途徑等,。由于第一和第二兩個(gè)前端反應(yīng)序列在C3交匯，因此C3常被稱(chēng)為補(bǔ)體系統(tǒng)的中心分子,。

3.末端補(bǔ)體復(fù)合物（terminal complement complex,，TCC）

由第一前端反應(yīng)形成的C3轉(zhuǎn)化酶C4b2a，以及由第二前端反應(yīng)途徑形成的C3轉(zhuǎn)化酶C3bBb,，在另一些C3b分子存在的情況下,，可分別形成第一途徑的C5轉(zhuǎn)化酶（C4b2a3b）及第二途徑的C5轉(zhuǎn)化酶（C3bBb3b或C3bnBb）。這兩種酶可將C5裂解為大,、小兩個(gè)片段C5b及C5a,，C5b上有C6受體，可結(jié)合成C5b6,，以后陸續(xù)與C7、C8及多分子C9結(jié)合,，最后形成C5b～9,，即TCC。TCC若在膜上有多個(gè)C9分子參與,，則形成（C5b~C8）-（C9）n,，即膜攻擊復(fù)合體（membrane attack complex，MAC）,，可使靶細(xì)胞溶破從而被消除（圖14-1）,。

血漿中的補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)激活后，血漿中的補(bǔ)體固有成分被消耗,，活性降低,，或補(bǔ)體分裂產(chǎn)物增加，故檢測(cè)補(bǔ)體各種成分及分裂產(chǎn)物的活性可反映補(bǔ)體系統(tǒng)激活的程度,。補(bǔ)體活性常用以下幾種方法來(lái)檢測(cè),，需要注意的是備測(cè)的血漿標(biāo)本必須為新鮮的或保存在-80~-70℃的溫度下，如保存溫度過(guò)高,、再溶化或使用血清標(biāo)本均可引起補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)的自發(fā)激活,，造成補(bǔ)體分裂產(chǎn)物的假性高值以及補(bǔ)體固有成分的假性低值,。

總補(bǔ)體測(cè)定可采用滴定的方法，其活性以每毫升未稀釋血清的溶血單位的50%來(lái)表示,。在補(bǔ)體中加入結(jié)合了抗羊紅細(xì)胞抗體的羊紅細(xì)胞,，應(yīng)用光度檢測(cè)法估計(jì)部分溶血的程度作為完-全溶血的百分比。血漿或血清中各種補(bǔ)體固有蛋白（如B因子,，D因子,、C1，C3,、C4,，C5、C6,、C7,、C8和C9）和調(diào)節(jié)因子（如因子1、C1-in）的濃度可用免疫技術(shù)測(cè)定,，如放射免疫擴(kuò)散,、火箭免疫電泳沉淀、雙向火箭免疫電泳沉淀等,，過(guò)敏毒素（C3a,、C4a和C5a）亦可用放射免疫檢測(cè)方法測(cè)定，其改良方法的試劑盒有市售,，這種方法是將EDTA-血漿與鹽酸混合,，因?yàn)?/span>C3或C5在酸性環(huán)境下變性沉淀，而對(duì)酸穩(wěn)定的過(guò)敏毒素仍保持溶解狀態(tài),。通過(guò)檢測(cè)C3a或C5a可分析補(bǔ)體激活的程度,，而測(cè)定C4a則可鑒別經(jīng)典抑或旁路激活途徑。亦有采用ELISA方法檢測(cè)過(guò)敏毒素的,。近20年來(lái)開(kāi)展了多種用以定量測(cè)定血漿末端C5b~9補(bǔ)體復(fù)合物的免疫測(cè)定方法研究,。

補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程，而補(bǔ)體的第一前端反應(yīng)一般需要激活才能順利進(jìn)行,，即C1r與C1s從酶原形式轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘牡鞍酌?/span>C1r和C1s,，這種激活分為自發(fā)性激活和激活物激活。自發(fā)性激活的速率較慢,；而激活物激活反應(yīng)迅速,，反應(yīng)量大，其激活物又可分為免疫性激活物與非免疫性激活物,。免疫性激活物一般指免疫復(fù)合物,，非免疫性激活物種類(lèi)多樣，按其化學(xué)性質(zhì)可分為蛋白質(zhì)類(lèi),、糖類(lèi),、脂類(lèi)等,。目前常依據(jù)其與C1q相互作用抑或與非C1q相互作用而分為兩大類(lèi)，革蘭陰性細(xì)菌的內(nèi)毒素LPS等就是已知的與C1q反應(yīng)的非免疫激活物,，纖維蛋白溶酶則是與非Clq反應(yīng)的非免疫性激活物,。下面介紹一下內(nèi)毒素激活補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)的過(guò)程和結(jié)果。

現(xiàn)已知道,，C1由C1q,、C1r、C1s三種亞成分組成,。其中,，C1q是補(bǔ)體激活途徑的識(shí)別單位，是補(bǔ)體激活劑的受體,，C1r 與C1s則為酶原,。內(nèi)毒素就是通過(guò)與C1q的膠原樣區(qū)相結(jié)合，進(jìn)而激活C1r,、C1s酶原變?yōu)?/span>C1s的,。后者為一種絲氨酸蛋白質(zhì)，催化C4b和C2成為C4b2,，經(jīng)過(guò)如圖14-2所示的途徑形成過(guò)敏毒素（C3a,、C5a）和末端補(bǔ)體復(fù)合物。