1、對細(xì)菌內(nèi)毒素活性影響

我們知道,，樣品中鐵、鋁等離子能夠引起細(xì)菌內(nèi)毒素活性的降低,，當(dāng)我們在內(nèi)毒素溶液中只需加入0. 04mM的鐵,，0. 02mM的鋁，就可引起內(nèi)毒素活性下降30%左右,，另外其他金屬離子如Mg2+,、Ga2+等也有這種影響。雖然這種情況對于臨床樣品測定影響不大,，但是我們在使用內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品稀釋過程及測定時要引起注意,。

2、測定方法的影響

前面我們已經(jīng)介紹,，在眾多鱟試驗法中,，作為臨床體外診斷試劑許可的常用內(nèi)毒素測定法，主要是微量定量的比濁時間分析法和合成基質(zhì)法兩種,。

1.比濁時間分析法

系根據(jù)LAL/TAL試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)所形成的濁度變化作為指標(biāo)的一種手段,，因此它很容易受到樣品中的濁度影響。但是我們知道,，測定中沒有絕對的濁度值,，由于是以變化率作為指標(biāo)，因此在有濁度的樣品中進(jìn)行測定時,，反應(yīng)過程中不受沒有非特異性濁度變化的情況是不可能的,，另外，使用表面活性劑的稀釋加熱法,，可使測定過程中的非特異濁度變化減輕,。今后，人們期待著開發(fā)能夠避免非特異濁度變化影響的前處理方法和測定方法。

2.合成基質(zhì)法

是以LAL/TAL試劑凝固酶肽合成基質(zhì)水解作為指標(biāo)和分析方法，分為終點比色法和動態(tài)比色法,。在終點比色法中,，由于測定分離PNA的對銷基苯胺的黃色(405nm)或偶氮化后的紅色(545nm)，因此要注意膽紅素等黃色物質(zhì)共存的影響以及各種磺胺類制備對紅色的假陽性影響,。

3.血漿成分的影響

血漿中的抗凝血酶Ⅲ,，a2纖維蛋白溶酶抑制劑等對LAL試劑中的凝固酶存在干擾作用，為了去除這些影響,，人們開發(fā)出了各種前處理方法,。另外血中還存在著對測定產(chǎn)生影響的各種各樣內(nèi)毒素結(jié)合物質(zhì)，如：甘油三酯核糖蛋白,，高密度核糖蛋白(HDL)及低密度核糖蛋白(LDL)LBP,、BPI等，這些物質(zhì)也會干擾鱟試驗測定,。這些物質(zhì)的影響可以考慮為對內(nèi)毒素活性干擾作用,。這些物質(zhì)在反應(yīng)液中存在時，就有可能抑制內(nèi)毒素的活性,，但是在使用酸處理或加熱處理測定血中的內(nèi)毒素時，這些蛋白性的內(nèi)毒素結(jié)合物質(zhì)變性的可能性很強,。因此,，我們在測定時要引起注意,。

4.我國發(fā)展現(xiàn)狀

到目前為止,，國外對于血中的微量細(xì)菌內(nèi)毒素測定一般均采用定量的動態(tài)比濁法和比色法，用于臨床的診斷及研究也十分普遍,，而且均具有專門的試劑盒,。國內(nèi)由于在定量方法上的研究起步較晚,，加之定量比色試劑也剛剛開發(fā)出來,，因此在臨床上的研究還剛剛開始。雖然有一些單位一直進(jìn)行這方面的檢驗工作,，但幾乎都是使用半定量凝膠法,，加之血液前處理方法的使用也各不相同，因此各個單位之間數(shù)據(jù)參差不齊,，無法比較,。故建立標(biāo)準(zhǔn)化前處理方法以及測定方法才能準(zhǔn)確檢測血中內(nèi)毒素,，為臨床的早期診斷提供理論依據(jù)。

相信在不遠(yuǎn)的將來,，內(nèi)毒素的含量測定將在臨床檢驗領(lǐng)域得到快速發(fā)展和應(yīng)用,。