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內(nèi)毒素的檢測(cè)——鱟試驗(yàn)法

時(shí)間:2022/8/3閱讀:1663
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內(nèi)毒素為革蘭氏陰性細(xì)菌及其它一些微生物如衣原體,、立克次氏體、螺旋體、單核細(xì)胞增多李斯特菌等胞壁中的類脂多糖(Lipopolysaccharide,,LPS)成分。內(nèi)毒素對(duì)機(jī)體有極為廣泛的作用,,可影響到機(jī)體幾乎每一個(gè)器官,、系統(tǒng)及生物功能。內(nèi)毒素對(duì)機(jī)體有多種毒害作用,,如熱原性,,致死作用,白細(xì)胞減少及增多,,斯氏反應(yīng),,彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC),骨髓壞死,,胚胎骨質(zhì)耗損,,血壓下降,血小板凝聚,,補(bǔ)體激活,,Hageman因子激活,誘導(dǎo)血漿原激活劑,,促進(jìn)前列腺素的合或,,抑制糖原異生的關(guān)鍵骨骼肌加速釋放氨基酸等等。因此,,臨床上革蘭氏陰性菌感染或膿毒癥時(shí),,如并發(fā)毒血癥和內(nèi)毒休克可有許多病理現(xiàn)象出現(xiàn),。最終可因心,、腎、肺,、肝等功能的衰竭而發(fā)生死亡,。

 

由于很小劑量的內(nèi)毒素即能引起極廣泛的生物作用及病理作用因此,,加強(qiáng)對(duì)內(nèi)毒素檢測(cè)的研究,,便成為臨床、公共衛(wèi)生,、藥檢系統(tǒng)等領(lǐng)域的重要課題之一,。在臨床上加強(qiáng)對(duì)革蘭陰性菌感染或革蘭氏陰性菌菌血癥,、膿毒癥時(shí)血清中內(nèi)毒素檢測(cè),,有利于及時(shí)發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素休克的發(fā)生,以迅速采取果斷的治療,。在公共衛(wèi)生及藥檢系統(tǒng)等面,,對(duì)水源、食品,、飲料,、各種藥物及生物制品進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè),可嚴(yán)格控制水源水,、食品、飲料,、各種藥物,、生物制品中的內(nèi)毒素含量,以將其控制在可接受的法定水平以下,,有利于保證人民的身體健康,。

 

 

鱟試驗(yàn)法

 

LT法又稱變形細(xì)胞溶解物試驗(yàn)Limulus amoebocyte lysateLAL,,是目前檢測(cè)內(nèi)毒最敏感的方法,。它比RT法敏感10100倍以上,可測(cè)出微量的內(nèi)毒素(0.011 ng/m1 ) ,,用微光電法及其它的改進(jìn)方法可測(cè)到微微克Pg/ml的水平,。而在RT法中敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg才能引起發(fā)熱而敏感性低的卻需注射0.5-10ug/ kg才能引起發(fā)熱。

 

LT法可廣泛地用于蘭氏陰性菌感染的快速診斷,,對(duì)患者的血液,、尿液及腦脊液可進(jìn)行直接的檢查。此法亦可用于檢查各種注射劑內(nèi)是否有內(nèi)毒素污染,。近十多年來,,隨著各種先進(jìn)的手段如同位素標(biāo)記技術(shù)光電技術(shù),、免疫電泳技術(shù)等應(yīng)用LT領(lǐng)域,,使LT法得到了許多改進(jìn),敏感性又日益提高,。

 

總之,,從目前來看,LT法為檢測(cè)內(nèi)毒素的最好方法,。其主要優(yōu)點(diǎn)就是敏感性高,,假陽性少,耗費(fèi)的試劑量少,,且設(shè)備簡(jiǎn)單,,實(shí)驗(yàn)時(shí)間短,適用于臨床,、衛(wèi)生事業(yè)及藥檢系統(tǒng)大規(guī)模地進(jìn)行,。如能解決好試劑、內(nèi)毒素及操作程序的標(biāo)化問題,,則LT法將是檢測(cè)內(nèi)毒素的最好方法,。

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