徠卡 TCS SP8 STED 超高分辨率顯微鏡——納米級世界的真正本質(zhì)  

納米顯微技術(shù)為亞細胞結(jié)構(gòu)和動態(tài)研究帶來了相當?shù)淖兓?，它正成為熒光成像新的標?(該技術(shù)榮獲 2014 年諾貝爾化學獎)。

高度整合的 STED (STimulated Emission Depletion,，受激發(fā)射損耗) 系統(tǒng) Leica TCS SP8 STED 3X 和 Leica TCS SP8 STED ONE 滿足日常研究的需求,，并且以純光學方式快速、直觀地呈現(xiàn)遠遠突破衍射極限的結(jié)構(gòu)細節(jié),。

X,、Y 和Z 軸上的分辨率都變得可調(diào)。

徠卡 TCS SP8 STED 超高分辨率顯微鏡主要特點

您想要從 STED 成像開始您的工作,？

無需投資購買儀器，即刻親見生命的奧秘,。新型 Leica TCS SP8 STED ONE 592 和 STED ONE 660 納米顯微鏡以多功能創(chuàng)新共聚焦平臺 Leica TCS SP8 為基礎(chǔ),，是納米顯微技術(shù)的戰(zhàn)略性入門設備。Leica HyD 混合檢測器將光譜檢測和靈敏度相結(jié)合,，并輔以白光激光的自由激發(fā),，使 Leica Microsystems 的 STED 納米顯微鏡成為一種靈活的工具，適用領(lǐng)域絕不僅止于納米顯微技術(shù),。

如果您需要盡可能多地進行多熒光團多顏色成像,，Leica TCS SP8 STED 3X 允許您使用多達三條 STED 譜線，在整個可見光全光譜內(nèi)進行STED成像,。

增強科研實力的技術(shù)

 ● 納米顯微技術(shù)可直接運用于 x,、y 和 z 軸，并且可調(diào),，為您揭示細微的結(jié)構(gòu)

 ● STED WHITE 物鏡提供全光譜范圍的色差校正

 ● motCORR STED 物鏡實現(xiàn)深度實時圖像

 ● 多條 STED 譜線支持全可見光全光譜超高分辨率成像

 ● 門控檢測提高分辨率,，改善活細胞成像性能

 ● 自動光束校準，確保穩(wěn)定性和可靠性

 ● Huygens 反卷積技術(shù),，從原始數(shù)據(jù)中獲取更多信息

 ● 基于 TCS SP8 的模塊化概念,，隨時升級

多色納米顯微技術(shù)

涵蓋可見光全光譜

多色標記的應用使我們對各種結(jié)構(gòu)的相互關(guān)系有了更深入的了解。共定位研究通常使用 STED ONE 納米顯微鏡來完成,。STED 3X 的多條 592 nm 和 660 nm STED 激光譜線以及 775 nm 脈沖激光 (分辨率可達 30 nm) 涵蓋可見光全光譜,，可以獲取許多適用的熒光團。

更多顏色,，成就與眾不同,！

白光激光,、AOBS (聲光分光器) 和可調(diào)光譜檢測器結(jié)合在一起，使您可對任何熒光團組合成像,，極度靈活地執(zhí)行多色實驗,。

HeLa 細胞三重免疫染色 STED 圖像：綠色：NUP153-Alexa 532，紅：網(wǎng)格蛋白-TMR,，白色：肌動蛋白-Alexa 488,。

光學器件成就的納米顯微技術(shù)

STED WHITE – 絲毫無損光學器件品質(zhì)

如果需要解析微小的細節(jié)，優(yōu)質(zhì)的光學器件是首要的關(guān)鍵前提,。三個 STED WHITE 物鏡色彩校正性能良好,，可確保在整個可見光譜范圍內(nèi)實現(xiàn)理想激發(fā)覆蓋和 z 軸 STED PSF?？稍?92/660/775STED使用白激光作為 激發(fā)光,。隨心所欲地為 STED 納米顯微技術(shù)自由選擇比以往更多的熒光團。

STED WHITE物鏡深活納米細胞

使用 STED WHITE 油浸物鏡 (HC PL APO 100x/1.40 OIL),，可輕松進行標準固定樣品成像,。它可實現(xiàn)非常高的數(shù)值孔徑和分辨率。對于較為復雜的實驗,，使用新型 STED WHITE Glycerin 物鏡 (HC PL APO 93X/1.30 GLYC motCORR) 可為您創(chuàng)造新的機遇,。電動修正環(huán)可根據(jù)不同的蓋玻片厚度、溫度和樣品不均勻性,，精確,、快速調(diào)節(jié)光學物鏡。3D STED 在室溫和 37°C 下都能清晰呈現(xiàn)樣品體表下的細節(jié)

新,！用于水介質(zhì)的STED White 物鏡,！

HCS PL APO 86x/1.2 W motCORR物鏡在水環(huán)境實驗中具有優(yōu)良性能。電動校正環(huán)結(jié)合折射率匹配使得該物鏡是水介質(zhì)成像的理想伙伴,。

STED WHITE 物鏡的色差校準,?；疑摼€和實線分別描繪不同景深,。

門控 STED – 通往活細胞納米顯微成像的坦途

gSTED – 圖像更多，精細結(jié)構(gòu)更入微

門控 STED 為備受認可的 STED CW 功能帶來實質(zhì)性的擴展,，能夠獲得更高的分辨率或選擇更低的激光功率,。

懸浮液中活 T細胞,。共聚焦和 STED 3D 重構(gòu)。大投影,。

特別感謝：英國牛津大學韋瑟羅爾分子醫(yī)學研究所,，MRC 人類免疫學研究單位，Marco Fritsche、Mathias Clausen 和 Christian Eggeling,。

使用 HyD 和白光激光實現(xiàn)低于 50 nm 的分辨率

Leica HyD 混合檢測器與作為脈沖激發(fā)源的白光激光搭配使用,，可以僅檢測來自激發(fā)脈沖之后某一時間窗口的熒光信號。平移時間窗,，使其遠離激發(fā)脈沖,，可實現(xiàn)遠低于 50 nm 的分辨率。在相同的激光功率下,，門控 STED 的分辨率比 STED CW 高 50% 以上,。無需更多的 STED 光便能觀察更細微的細節(jié)，提升活細胞的成像能力,。

在 STED CW 顯微鏡有效焦點上,，熒光團生命周期的分配。長壽命狀態(tài) (紅色) 處于中心區(qū)域,，短壽命狀態(tài) (藍色) 處于外圍區(qū)域,。

第三維度的 STED

多條 STED 光路 

使用 TCS SP8 STED 3X 和 TCS SP8 STED ONE，儀器可提供兩條光路,，產(chǎn)生不同的 STED 模式,。STED 光可在兩條光路之間無級分配。

設計您的 PSF

您可選擇理想橫向分辨率,、縱向分辨率或兩者之間的任意設置,，以獲取理想的結(jié)果。超薄的光學切面為您揭示不為人知的細節(jié),。STED 3X 和 STED ONE 使您的顯微鏡分辨率在所有維度都能契合您的科學問題和樣品需要。

選擇您的分辨率

通過在兩條 STED 光路中分配光線提升分辨率：傳統(tǒng)渦流圓環(huán)可實現(xiàn)理想橫向分辨率,，新型 z 軸圓環(huán)可實現(xiàn)理想縱向分辨率,。還可針對小聚焦容積進行優(yōu)化。

STED 軟件解決方案 – 對分辨率了如指掌

STED 顯微技術(shù)是快速直接的超高分辨顯微技術(shù),。使用 LAS X,，您可暢享其便捷性。通過預估的有效 PSF 示意圖,，可以直接在線查看對所選技術(shù)參數(shù)效果的反饋,。

直觀的工作流程

通過智能 STED 向?qū)В恍杌瑒尤齻€簡單的滑塊,，便可控制儀器,。借助有效 PSF 示意圖，在衍射極限的情況下,，您可定義您所需的超高分辨率等級,。為了得到理想結(jié)果，向?qū)⒄{(diào)節(jié)所有必要的設置，如 STED 激光強度,、像素尺寸,、Z 步進、針孔,、門控設置和圖像平均次數(shù),。

智能 STED 工作流程：1. 使用 STED 和 3D 滑塊調(diào)節(jié)所需的有效 PSF。2. 使用劑量滑塊在信噪比和圖像數(shù)量之間選擇,。

3. 確定共聚焦實時掃描時的感興趣區(qū)域,，并相應調(diào)節(jié)激發(fā)光。4. 采集單幅或自動序列圖像,，獲得超高分辨率數(shù)據(jù),。