美國(guó)Bio-Rad伯樂變性梯度凝膠電泳DGGE
- 公司名稱 上海富眾生物科學(xué)有限公司
- 品牌 Bio-Rad/伯樂
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 美國(guó)
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2017/7/4 13:05:51
- 訪問次數(shù) 7136
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雷勃LabsystemsMK3,、伯樂Bio-rad680、寶特Elx-800,、奧地利安圖斯2010,、雷杜酶標(biāo)儀/雷勃LabsystemsMK2,、伯樂Bio-rad1575、寶特Elx-50洗板機(jī)/日本三洋SANYO（MDF-382E超低溫冰箱,、MIR-253低溫培養(yǎng)箱,、MLS-3750高壓滅菌器、CO2培養(yǎng)箱）/Shellab（1004分子雜交箱,、2306二氧化碳培養(yǎng)箱,、WPC65水浴箱）/美國(guó)Millipore Q Biocel 純水系統(tǒng)/德國(guó)艾本德eppendorf、大龍,、雷勃Labsystems,、法國(guó)吉爾森Gilson 移液器/德國(guó)艾本德eppendorf5415D、德國(guó)賀力氏Heraeus Primo R 離心機(jī)/美國(guó)ABI 2720 9700,、德國(guó)艾本德eppendorf5332 PCR基因擴(kuò)增儀/德國(guó)Heraeus（賀力氏）BB15,、美國(guó)REVCO 3000T、美國(guó)熱電Foma3111 二氧化碳培養(yǎng)箱/梅特勒Mettler Toledo,、賽多利斯 分析天平/全系列Bio-rad電泳系統(tǒng)/美國(guó)MEDICA全自動(dòng)電解質(zhì)分析儀/新加坡ESCO二級(jí)生安全柜/意大利Scout 半自動(dòng)生化分析儀/數(shù)碼相機(jī)型,、CCD型 凝膠成像/數(shù)碼相機(jī)型、CCD型 顯微成像/ 國(guó)產(chǎn)（制冰機(jī),、各類實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱,、可見分光光度計(jì)、微量熒光檢測(cè)儀）/各類實(shí)驗(yàn)室耗才（吸嘴,、離心管,、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿,、比色皿,、培養(yǎng)瓶、酶標(biāo)板,、離心管架,、吸嘴盒、封口膜）
運(yùn)用DGGE搜尋未知突變
DGGE 是基于以下原理,，即增加聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)變性劑的濃度會(huì)熔解雙鏈DNA 的不同區(qū)域,。當(dāng)溫度達(dá)到zui低熔解度區(qū)域的熔解溫度Tm 時(shí)，DNA 部分熔解,，在凝膠中形成遷移率下降的分支分子（Myers et al.1987）,。在均一的運(yùn)行溫度（50—
- 溫度控制模塊提供45–70°C 內(nèi)的*運(yùn)行溫度
- 系統(tǒng)可運(yùn)行2 塊16 x 16 cm 凝膠或4 塊7.5 x 10 cm 凝膠
- 可選擇的MacMelt 或WinMelt 軟件優(yōu)化了GC 夾及引物的置放
DGGE 的兩種模式。A ,，凝膠的變性梯度方向與電泳方向垂直。從原生乳腺癌種擴(kuò)增的p53 基因6 號(hào)外顯子的野生型和突變型等位基因通過垂直DGGE（80V,，
DGGE分離示意圖。所示為一個(gè)變性梯度方向與電泳方向垂直的凝膠,，以及一個(gè)有單個(gè)熔解區(qū)域的目標(biāo)序列,。野生型和突變型樣品加入到制備孔內(nèi)。在低變性劑濃度時(shí),，DNA 片段為雙鏈,，但當(dāng)濃度增加時(shí)雙鏈DNA 開始熔解，形成分枝分子,。到濃度非常高時(shí),，DNA 片段可熔解形成2條單鏈。
運(yùn)用DGGE搜尋未知突變
DGGE 是基于以下原理,，即增加聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)變性劑的濃度會(huì)熔解雙鏈DNA 的不同區(qū)域,。當(dāng)溫度達(dá)到zui低熔解度區(qū)域的熔解溫度Tm 時(shí)，DNA 部分熔解,，在凝膠中形成遷移率下降的分支分子（Myers et al.1987）,。在均一的運(yùn)行溫度（50—
- 溫度控制模塊提供45–70°C 內(nèi)的*運(yùn)行溫度
- 系統(tǒng)可運(yùn)行2 塊16 x 16 cm 凝膠或4 塊7.5 x 10 cm 凝膠
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DGGE 的兩種模式。A ,，凝膠的變性梯度方向與電泳方向垂直,。從原生乳腺癌種擴(kuò)增的p53 基因6 號(hào)外顯子的野生型和突變型等位基因通過垂直DGGE（80V，
DGGE分離示意圖,。所示為一個(gè)變性梯度方向與電泳方向垂直的凝膠，以及一個(gè)有單個(gè)熔解區(qū)域的目標(biāo)序列,。野生型和突變型樣品加入到制備孔內(nèi),。在低變性劑濃度時(shí)，DNA 片段為雙鏈,，但當(dāng)濃度增加時(shí)雙鏈DNA 開始熔解,，形成分枝分子。到濃度非常高時(shí),，DNA 片段可熔解形成2條單鏈,。
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