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凋亡細胞/壞死細胞鑒別試劑盒

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),,可以為各類研究機構提供符合標準規(guī)范的原代細胞,、腫瘤細胞及相關實驗技術服務;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學和南京醫(yī)科大學多名博士組成的研發(fā)團隊,,致力于為您的細胞研究及細胞培養(yǎng)實驗提供高品質,、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,做“您身邊的細胞培養(yǎng)專家”,。細胞培養(yǎng)提供全程服務,,產(chǎn)品涵蓋原代細胞、細胞系,、免疫細胞及干細胞,、胎牛血清、無血清非程序凍存液,、培養(yǎng)基,、基礎培養(yǎng)基、“支原體”,、“黑膠蟲”清除試劑,、細胞因子、胰酶,、雙抗等細胞培養(yǎng)及實驗相關產(chǎn)品,。

  公司設立質量管理部,建立了高標準的質檢系統(tǒng),產(chǎn)品從原料,、半成品,、成品入庫到銷售之前,每一個環(huán)節(jié)都有嚴格的質檢標準,,并以標準的生產(chǎn)工藝,,保證產(chǎn)品質量的穩(wěn)定性。



胎牛血清,,原代細胞,,耐藥細胞,標記細胞,,LUC標記細胞,,培養(yǎng)基

 

 活細胞/凋亡細胞/壞死細胞鑒別試劑盒
( Normal/Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit)
Cat numberKGA             For Research Use Only
Store atRT for one year
Expire date


 

一、試劑盒說明
細胞壞死和凋亡是兩種截然不同的細胞學現(xiàn)象,,二者發(fā)生的過程在形態(tài)學上有很大的區(qū)別,。在細胞壞死時,細胞膜發(fā)生滲漏,,細胞內容物包括細胞器以及染色質釋放到胞外,。而在細胞凋亡過程,起始階段,,染色質固縮,、分離并沿核膜分布,細胞質亦發(fā)生固縮,,但細胞膜依然完整未失去選擇透性,;在凋亡后期,核染色質斷裂為大小不等的片斷,,與某些細胞器如線粒體一起聚集,,為反折的細胞膜所包圍,以后逐漸分離,,形成凋亡小體,。
本產(chǎn)品提供的染料可以分別對正常細胞、凋亡細胞和壞死細胞的細胞核進行染色,。其染色原理為:Dye Reagent 1只進入活細胞,,正常的細胞核及處于凋亡早期的細胞核呈現(xiàn)綠色;Dye Reagent 2只能進入死細胞,,將死細胞以及凋亡晚期的細胞核染成橙色,。因此通過在熒光顯微鏡下觀察細胞顯色和形態(tài)的不同,可以同時將正常細胞,、壞死細胞,、凋亡早期細胞和凋亡晚期細胞區(qū)分開來,。
二、試劑盒組份

組份
Cat: KGA501
50 assays
Cat: KGA502
100 assays
儲存條件
Dye Reagent 1
25μL
50μL
室溫避光
Dye Reagent 2
25μL
50μL
室溫避光

三,、試劑盒以外自備儀器和試劑
熒光顯微鏡(510nm激發(fā)波長),、載玻片、蓋玻片,、1.5m L Microtube,、微量移液器
四、注意事項
1.        Dye Reagent 1,、2Mixed Dyes Reagent有毒,,操作時請戴手套;
2.        根據(jù)需要檢測的實際樣品數(shù)在使用前將兩種染料混合,,剩余混合染液注意避光保存留待下次使用,;
3.        利用血球計數(shù)板進行該項操作時,不要用血計板配套的那種質地較硬的蓋玻片,,而用普通的蓋玻片反而更利于結果的觀察。
五,、操作方法
1.          用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡,;
2.          PBS洗滌細胞二次,并配成濃度為5×105~6×106cells/ml細胞懸液,;
3.          Dye Reagent 1Dye Reagent 2等體積混合形成Mixed Dyes Reagent(見注意事項2),;
4.          吸取25μL細胞懸液同1μLMixed Dyes Reagent輕輕混勻;
5.          吸取上述10μL的混合液置于一潔凈的載玻片,,并用蓋玻片蓋上細胞(見注意事項3),;
6.          熒光顯微鏡510nm激發(fā)波長觀察,分別對下列四類細胞進行計數(shù),,注意細胞總量須超過200個,。
正常細胞:細胞呈圓形,核質體被均勻染成綠色,,大小形狀較單一,;
壞死細胞:細胞呈橢園形,核質體被均勻染成橙黃色,,大小形狀較單一,;
凋亡早期細胞:核質體呈綠色,細胞形狀不規(guī)則,,如呈新月形,,;
凋亡晚期細胞:核質體呈橙色,,染色質濃縮,,細胞核碎裂成點狀,大小不一,可見胞質芽狀突


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