鴿子飛行能力基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）使用說明書   

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：鴿子飛行能力基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）  

【預(yù)期用途】

本試劑盒用于鴿子飛行能力基因定性檢測,，可對鴿子的飛行能力進(jìn)行預(yù)測。  

【檢測原理】

根據(jù)鴿子飛行能力基因設(shè)計特異性引物和探針,，利用熒光定量PCR技術(shù),，通過檢測熒光的釋放和強(qiáng)度，來檢測飛行能力基因,。  

【試劑盒組成】

本產(chǎn)品由特異性引物探針,、Taq酶以及反應(yīng)緩沖液組成。

【主要組成成分】

【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存有效期為12個月,；切忌反復(fù)凍融,。

【樣本要求】

1、羽毛：采集胸部或腹部或腿部羽毛2根,，切忌使用自然脫落的羽毛,。  

2、全血：使用EDTA作為抗凝劑,，切忌使用肝素抗凝,。要求使用新鮮全血，或在2～8℃保存不超過7天,，或在-20℃以下保存不超過一個月,，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融。  

【檢驗(yàn)方法】

1,、樣本處理與核酸提取,，具體操作參照相關(guān)操作說明書。

（1）0.2ml PCR管中,，加入羽毛2-4根,，加入Reagent A 20ul（注意淹沒樣本），99℃加熱20分鐘,；  

（2）向上一步的Pcr管中加入Reagent B 100ul,，5000rpm離心30秒-1分鐘,，備用；  

2,、儀器準(zhǔn)備將每臺儀器接通電源,，檢查是否運(yùn)轉(zhuǎn)正常。  

3,、物品準(zhǔn)備：離心機(jī),、冰盒、移液器,、吸頭,；試劑準(zhǔn)備（未分裝規(guī)格使用）：將PCR反應(yīng)液解凍、混勻,，瞬時離心后分裝14µL/管,。

4、 PCR擴(kuò)增條件（反應(yīng)體系為20μL）

5,、熒光定量檢測  

結(jié)果判定  

【檢驗(yàn)方法局限性】

本方法只適用于鴿子飛行能力基因檢測。  

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.  特異性：對特異性參考品進(jìn)行檢測,，所有參考品檢測結(jié)果陰性,。  

2.  準(zhǔn)確性：對檢測范圍內(nèi)的不同基因型的參考品進(jìn)行檢測，能檢出相應(yīng)基因型,。  

3.  檢出限：應(yīng)不高于5ng/µL,。  

4.  重復(fù)性：檢測范圍內(nèi)的不同基因型的重復(fù)性參考品，每個參考品進(jìn)行10次檢測,，結(jié)果能準(zhǔn)確分型，且相應(yīng)檢測結(jié)果Ct值的變異系數(shù)（CV）應(yīng)≤5.0%,。  

5.  有效期：試劑盒于-20避光保存,，有效期為12個月。  

【注意事項(xiàng)】 實(shí)驗(yàn)前請仔細(xì)閱讀說明書

1. 本試劑盒僅鴿子飛行能力基因體外檢測,。有關(guān)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范嚴(yán)格按照行政主管部門頒布的有關(guān)基因擴(kuò)增檢測實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)定執(zhí)行,。  

2. 試劑盒應(yīng)低溫運(yùn)輸和保存，試劑盒內(nèi)各試劑使用前,，請短暫離心,。  

3. 檢測時，提取樣本必須在生物安全柜中進(jìn)行,，且使用時要注意橫向污染,。  

4. 實(shí)驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)操作：區(qū)：試劑制備區(qū)—準(zhǔn)備擴(kuò)增所需試劑,；  

第二區(qū)：樣本處理區(qū)—待測樣本和對照品處理；  

第三區(qū)：PCR擴(kuò)增區(qū)—PCR擴(kuò)增檢測,。  

本產(chǎn)品為一次性用品,，使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應(yīng)作為傳染源按照國家相關(guān)法律法規(guī)處理。